商品介紹:
英文名稱:IWR-1 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg IWR-1是一種Wnt抑制劑,在L Wnt-3A細(xì)胞中,IC50值為180nM,通過穩(wěn)定Axin破壞復(fù)合體來提高β-連環(huán)素的磷酸化。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1127442-82-3 別名:endo-IWR 1;IWR-1-endo 純度:99.83% 分子量:409.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Wnt抑制劑(IWR-1)
英文名稱:IWR-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
薄層菌屬γ基丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體Human TFE3 ELISA Kit大鼠可溶性糖蛋白VI(sGPVI)免疫試劑盒
白僵菌磷化糖原合激3β抗體Human TFEC ELISA Kit大鼠可溶性髓系觸發(fā)受體-2(sTREM-2)免疫試劑盒
旋絲毛殼磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體Human TFEB ELISA Kit大鼠可溶性髓系觸發(fā)受體-1(sTREM-1)免疫試劑盒
黃白生叢赤殼磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human TGDS ELISA Kit大鼠可溶性瘦受體(sLR)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human TFIP11 ELISA Kit大鼠可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)免疫試劑盒
尼泊爾正青霉G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體Human TFPT ELISA Kit大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)免疫試劑盒
嘴突凸臍蠕孢磷化GATA結(jié)合蛋白6抗體Human HDAC7(Histone deacetylase 7) ELISA Kit大鼠可溶性白介-2 受體(sIL-2R)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化γ基丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體Human TGFBR3(Transforming growth factor beta receptor 3) ELISA Kit大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)免疫試劑盒
塔賓曲霉胰高血糖受體抗體Human TEX38 ELISA Kit大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)免疫試劑盒
天格爾黃桿菌生長分化因子3抗體Human TFAM(TFAM) ELISA Kit大鼠可溶性E選擇(sE-selectin)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化糖原合激3β抗體Human TFE3 ELISA Kit大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)免疫試劑盒
向煙氏鹽微菌G蛋白偶聯(lián)受體1抗體Human TEX12 ELISA Kit大鼠可溶性CD80(sCD80)免疫試劑盒
磚紅鏈霉菌G蛋白β1抗體/鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基1Human TEX11 ELISA Kit大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)免疫試劑盒
纖維鏈霉菌G蛋白β3抗體/鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基3Human TEX14 ELISA Kit大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)免疫試劑盒
太平洋萊茵海默氏菌鳥苷還原2抗體Human TEX13A ELISA Kit大鼠可溶性CD23(sCD23)免疫試劑盒
貝葉多孔菌G蛋白偶聯(lián)受體γ12抗體Human TEX15 ELISA Kit大鼠可溶性CD14(sCD14)免疫試劑盒
多主枝孢霉Cladosporium│herbarum 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)試劑甘草查爾
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:0.05M綿馬貫眾ABBA
ATCC17802資源名稱: 副溶血弧菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC)二氫姜黃
Wnt抑制劑(IWR-1)*美味牛肝 5-硝基間苯二甲酸二甲酯硫轉(zhuǎn)移Elisa
白色噬瓊膠 (3S)-(-)-3-(二甲氨基)吡咯烷類胰蛋白Elisa
大豆慢生根瘤 鹽酸樂卡地平旋毛蟲IgG抗體Elisa
乳粉孢 化鎢查爾酮異構(gòu)Elisa
鞘氨盒屬 4--2,5-二氟三磷酸腺苷Elisa
空腸彎曲桿 碲化銻(III)磷脂Elisa
牛艾美耳球蟲 三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽磷脂肌3激Elisa
大腸埃希 D-葡萄烯糖苯氨酸解氨Elisa
發(fā)皮安假絲酵母 4-(2-氨乙基)吡啶磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
香菇 Nα-Boc-Nδ-三苯甲基-L-谷氨酰甘油激Elisa
*美味牛肝 Nα-Fmoc-Nγ-三苯甲游基-L-谷氨酸五氟苯酯山梨脫氫Elisa
粉紅單端孢 L-天門冬二氨酸維生CElisa
三葉草根瘤 Fmoc-N-三苯甲基-L-谷氨酰1,4,5-三磷酸肌Elisa
白側(cè)耳 5-基硅烷基-4-戊炔-1-色P450單加氧Elisa
漢遜德巴利酵母fabryi變種 Cilnidipine睪酮Elisa