γ-分泌酶抑制劑(YO-01027)公司*的產(chǎn)品：Lep IgG (Rabbit Leptospira IgG) ELISA Kit 兔鉤端螺旋體IgG AR,99.0%
F1+2 (Rabbit prothrombin fragment 1+2) ELISA Kit 兔凝血原片段F1+2 CP,85.0%
ADM (Rabbit soluble endothelial protein

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：γ-分泌酶抑制劑(YO-01027)

英文名稱：YO-01027

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

海泥黃桿菌APC標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-ZP1 Antibody成纖維生長(zhǎng)因子17(FGF17)

德氏鏈霉菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-ZP3 Antibody成纖維生長(zhǎng)因子13(FGF13)

腐皮鐮孢Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-ZP2 Antibody成纖維生長(zhǎng)因子12(FGF12)

夏威夷平臍蠕孢Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗水貂IgGBrdU成纖維生長(zhǎng)因子11(FGF11)

Chryseobacterium vietnamense Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-β-catenin Antibody成纖維激活蛋白α(FAPα)

新疆糖絲菌PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-ZWINT Antibody成神經(jīng)瘤抑制瘤變蛋白1(NBL1)

海綿假單胞菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-β-catenin Antibody成肌分化蛋白(MyoD)

鞘菌屬堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-FXR2(Human) pAb成簇蛋白(TUFT)

喬治亞青霉FITC標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-EIF4G2(Human/Mouse) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白7(SIRT7)

強(qiáng)雄腐霉羅丹明標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-β-catenin Antibody沉默調(diào)節(jié)蛋白6(SIRT6)

大彎桿菌膠體金標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-KHDRBS1(Human) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白5(SIRT5)

粉紅聚端孢羅丹明標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-PABPN1(Human) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白4(SIRT4)

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)膠體金標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SLC3A1(rBAT)(Human) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白3(SIRT3)

產(chǎn)黃青霉FITC標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SLC7A4(CAT4)(Human) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白2(SIRT2)

Erythrobacter pelagi 堿性磷（AP）標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SLC43A1(LAT3)(Human) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)

季也蒙假絲酵母辣根過氧化物標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SLC22A5(OCTN2)(Human) pAb巢蛋白2(NID2)

腫瘤抑制基因PHLPP抗體白色噬瓊膠菌大鼠心肌組織提取物

脯脫氫抗體鼠李糖乳桿菌大鼠腸靜脈組織提取物胞

原鈣粘蛋白12抗體噬糖鹽紅菌大鼠胃粘膜組織提取物

造血干細(xì)胞抗原CD133相關(guān)蛋白抗體師崗鏈霉菌大鼠小腸粘膜組織提取物
γ-分泌酶抑制劑(YO-01027)枯草芽孢桿 Kongensin A

雞傷寒沙門氏 Kazinol U

豬霍亂沙門氏 Isoscabertopin

阿木吉氏鏈霉 胡蔓藤堿乙

根異莖點(diǎn)霉 ent-16-Kaurene-3β,15β,18-triol

膠韌革(榆耳，榆蘑) ent-11β-Hydroxyatis-16-ene-3,14-

釀酒酵母 Deoxycalyciphylline B

膜醭畢赤酵母 Dehydroborapetoside B

地衣芽孢桿 Dehydroadynerigenin β-neritriosi

假堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 Daturataturin A

近弧狀短波單胞 Chloramultilide C

節(jié)桿 Chloramultilide B

孢小克銀漢霉 Carabrolactone B

大腸桿 蒼山香茶菜

草木棲劍 Bisandrographolide C