商品介紹:
SN50是可滲透細(xì)胞的NF-κB抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):213546-53-3 別名:NF-kB Inhibitor;AAVALLPAVLLALLAPVQRKRQKLMP;Ala-Ala-Val-Ala-Leu-Leu-Pro-Ala-Val-Leu-Leu-Ala-Leu-Leu-Ala-Pro-Val-Gln-Arg-Lys-Arg-Gln-Lys-Leu-Met-Pro 純度:97.81% 分子量:2781.5 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
NF-κB抑制劑(SN50) | SN50 | 1mL(10mM)|1mg|5mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
空腸彎曲桿菌脂聯(lián)受體2抗體Human LSM8 ELISA Kit豬去乙?;囸I激(dGHRL)免疫試劑盒
釀酒酵母ANGEL1蛋白抗體Human LSP1 ELISA Kit豬去甲腎上腺(NE)免疫試劑盒
高粱生平臍蠕孢ANGEL2蛋白抗體Human LSR ELISA Kit豬趨化因子配體28(CCL28)免疫試劑盒
糞腸球菌ANKLE2蛋白抗體Human LTBP1(Latent-transforming growth factor beta-binding protein 1) ELISA Kit豬(HYD)免疫試劑盒
彩色豆馬勃特異性錨樣蛋白1抗體Human LUC7L ELISA Kit豬前列腺G/H合2(PTGS2)免疫試劑盒
黑曲霉錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體Human LUC7L2 ELISA Kit豬前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體Human LY6D ELISA Kit豬前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
白色鏈孢囊菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體Human LUZP1 ELISA Kit豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體Human LXN ELISA Kit豬皮質(zhì)抑/皮質(zhì)穩(wěn)定蛋白(CORT)免疫試劑盒
核盤菌(正確)錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體Human LSM10 ELISA Kit豬皮質(zhì)(CORT)免疫試劑盒
假腸膜明串珠菌氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成6G抗體Human LY6E ELISA Kit豬皮質(zhì)類固結(jié)合球蛋白(SERPINA6)免疫試劑盒
瓶孢青霉錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體Human LSM11 ELISA Kit豬皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
勞地毛霉錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體Human LY6G5B ELISA Kit豬XIIIB鏈(F13B)免疫試劑盒
釀酒酵母型肝炎病核結(jié)合蛋白-1抗體Human LSM14A ELISA Kit豬XIIIA鏈(F13A1)免疫試劑盒
糙孢藍(lán)狀菌芳香基硫酯K抗體Human LRRC4C ELISA Kit豬X(F10)免疫試劑盒
粉紅粘帚霉神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體Human LRRC8C ELISA Kit豬ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫試劑盒
乳桿菌屬Lactobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR補(bǔ)體片斷5b試劑盒左旋千金藤啶堿
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR補(bǔ)體片斷5a試劑盒紫蘇
竹喙球菌Ceratosphaeria│phyllostachydis Zhang 質(zhì)量規(guī)格:活:20萬u/g補(bǔ)體片斷4b試劑盒竹紅菌乙
NF-κB抑制劑(SN50)組織蛋白A抗體IgE-Fc片段受體Ⅱ(FcεRⅡ)檢測(cè)試劑盒FcεRⅡ ELISA Kit
CD34抗體G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)檢測(cè)試劑盒GPR120 ELISA Kit
周期D3抗體G蛋白偶聯(lián)雌激受體1(GPER)檢測(cè)試劑盒GPER ELISA Kit
緊密連接蛋白1抗體(C端)G蛋白β1(GNβ1)檢測(cè)試劑盒GNβ1 ELISA Kit
轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體Gremlin1蛋白(GREM1)檢測(cè)試劑盒GREM1 ELISA Kit
核黃轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)檢測(cè)試劑盒GATA2 ELISA Kit
磷化鈣介質(zhì)抗體F-框亮豐富重復(fù)蛋白3(FBXL3)檢測(cè)試劑盒FBXL3 ELISA Kit
7號(hào)染色體開放閱讀框26抗體FK506結(jié)合蛋白樣蛋白(FKBPL)檢測(cè)試劑盒FKBPL ELISA Kit
衰變加速因子CD55抗體E選擇(SELE)檢測(cè)試劑盒SELE ELISA Kit