PRMT3變構(gòu)抑制劑(SGC707)公司正在出售的產(chǎn)品：GATA-4/FITC 熒光標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白4抗體IgG小豆蔻油 FCC
GATA-5/FITC 熒光標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白5抗體IgGL-香芹 97%
GATA-6/FITC 熒光標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白6抗體IgGL-香芹 95%,FG
Gax/FITC 熒光標(biāo)記生長終止特異性同源盒因抗體IgG杉葉油 natural
GCK/

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
腐霉*人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白Anti-OR6J1 Antibody人透明質(zhì)(HAase)

菊粉血桿菌大鼠糖皮質(zhì)激受體αAnti-OR6Q1 Antibody人透明質(zhì)(HAase)

褐離褶傘小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體αAnti-OR6K2 Antibody人天門冬基轉(zhuǎn)移(AST)

果生鏈核盤菌小鼠血小板衍生生長因子ABAnti-OR6S1 Antibody人天門冬基轉(zhuǎn)移(AST)

細(xì)鏈格孢大鼠Ⅳ型膠原Anti-OR6T1 Antibody人性磷(ACP)

殺真菌鏈霉菌人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子Anti-OR6P1 Antibody人性磷(ACP)

狹窄革菌大鼠己糖激Anti-OR7A10 Antibody人葡萄糖6磷異構(gòu)(GPI)

耐鹽枝孢小鼠P選擇Anti-OR7C1 Antibody人葡萄糖6磷異構(gòu)(GPI)

巨枝膝梗孢人白活化黏附因子Anti-OR7E5P Antibody人磷葡萄糖變位(PGM)

蠟葉曲霉小鼠L解Anti-OR7C2 Antibody人磷葡萄糖變位(PGM)

異常威克漢姆酵母大鼠糖原合成激Anti-OR89 Antibody人亮?；?LAP)

根瘤菌人活化AAnti-OR8B2 Antibody人亮?；?LAP)

青變色鏈霉菌人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1Anti-OR8B4 Antibody人鏈激(SK)

多色節(jié)桿菌大鼠CXC趨化因子配體16Anti-OR8B2 Antibody人鏈激(SK)

季也蒙邁耶氏酵母小鼠可溶性CD30配體Anti-OR89 Antibody人核糖核(RNASE)

釀酒酵母大鼠高敏狀腺原Anti-OR8G1 Antibody人核糖核(RNASE)

復(fù)制因子A蛋白2#黑腐皮殼菌人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞

Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體殼梭孢屬小鼠Lewis肺癌瘤株

RAS相關(guān)蛋白癌基因Rab14抗體#黑蔥花霉屬615小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤瘤株

環(huán)指蛋白148抗體#齒梗孢霉屬KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株
PRMT3變構(gòu)抑制劑(SGC707)釀酒酵母 二氫辣椒堿

臭曲霉 辣椒堿（天然）

臭曲霉 β-谷甾

芽孢桿 羥基積雪草酸

布氏白僵 積雪草酸

淡紫擬青霉 羥基積雪草苷

木克酵母屬 積雪草苷

慢生根瘤 D-(+)-木糖

黒曲霉 異鼠李

橫梗霉屬 鹽酸川芎

釀酒酵母 川芎

藤倉赤霉 川楝

平菇(高1) 紫草

黑曲霉 番瀉苷D

突孢毛殼 番瀉苷C