公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PTEN抑制劑(SF1670)
英文名稱:SF1670
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
SF1670是一種有效的特異性的人第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源蛋白(PTEN)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):345630-40-2 純度:98.0% 分子量:307.34 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
聚生殼菌ZCWCC1抗體Anti-MT-CO1 Antibody葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9(GLUT9)
破傷風(fēng)梭菌鋅指蛋白300抗體Anti-MT-ND4 Antibody葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8(GLUT8)
葡萄座腔菌鋅指蛋白ZBTB39抗體Anti-MTA2 Antibody葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7(GLUT7)
釀酒酵母鋅指蛋白201抗體Anti-MTA1 Antibody葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6(GLUT6)
球孢白僵菌鋅指蛋白Zic2抗體Anti-MTOR Antibody葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(GLUT5)
多主葡萄殼菌鋅指蛋白Zdhhc18抗體Anti-MTOR Antibody葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)
耐鹽枝孢鋅指蛋白Zdhhc12抗體Anti-MTDH Antibody(PB0309)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白14(GLUT14)
肉桂色鏈霉菌著絲粒ZW10相互作用蛋白1抗體Anti-MTR Antibody葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12(GLUT12)
土壤彎孢鋅指/環(huán)指蛋白1抗體Anti-MTTP Antibody葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白11(GLUT11)
維多利亞隱球酵母鋅指/環(huán)指蛋白2抗體Anti-MTUS1 Antibody葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白10(GLUT10)
假單胞菌鋅指蛋白3/環(huán)指蛋白3抗體Anti-MUC1 Antibody葡萄糖磷變位5(PGM5)
阪崎腸桿菌鋅指蛋白230抗體Anti-MUC1 Antibody葡萄糖磷變位3(PGM3)
多分枝毛霉鋅指脂蛋白-1b抗體Anti-MUC1 Antibody葡萄糖磷變位2樣蛋白1(PGM2L1)
角形小孔菌zeta相關(guān)蛋白70抗體Anti-MUC1 Antibody葡萄糖磷變位1(PGM1)
枯草芽孢桿菌白血病相關(guān)新基因抗體Anti-MUC1 Antibody(PB0154)葡萄糖磷變位(PGM2)
海仙菌屬鋅指蛋白307抗體Anti-MUC2 Antibody葡萄糖苷β(GUSβ)
神經(jīng)降壓受體3抗體糖蛋白95假百喉棒桿菌人宮頸癌組織源細(xì)胞
轉(zhuǎn)錄因子SOX10抗體檸檬色明串珠菌人皮膚癌組織源細(xì)胞
增食欲A/欲激A抗體有害片球菌人子宮癌組織源細(xì)胞
鋅指蛋白339抗體假腸膜明串珠菌腸人直腸癌組織源細(xì)胞
PTEN抑制劑(SF1670)德沃氏屬 三乙烯二褪黑Elisa
茶葉 聯(lián)苯菊酯 檸檬酸鐵銨肌糖原Elisa
藤黃熒光馬杜拉放線 檸檬酸氫二銨檸檬酸合Elisa
枯草芽孢桿 亮藍(lán)色C氧化Elisa
大腸桿屬 化乙酰泛醌還原Elisa
鳥氨酸芽孢桿屬種 腸脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa
球孢白僵 N-反-肉桂基-N-甲基-(1-萘甲基)鹽酸鹽成熟促進(jìn)因子Elisa
毛霉屬 烏來(lái)糖甲基轉(zhuǎn)移Elisa
豬丹絲 香菇多糖磺基轉(zhuǎn)移Elisa
葡萄座腔 檸檬芳香-N-乙酰基轉(zhuǎn)移Elisa
賴氨酸芽胞桿屬 2,3-二羥基一氧化氮合成Elisa
高盧蜜環(huán) 4-甲基七葉亭γ氨基丁酸Elisa
伯克霍爾德氏 DL-2-氨基丁酸蛋白質(zhì)羥基Elisa
腸出血性大腸桿 2,2-雙(4-)-1,1-二乙烯琥珀酸脫氫Elisa
美澳型核果褐腐病 銨酪氨酸Elisa