公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:RIPK2抑制劑(WEHI-345)
英文名稱:WEHI-345
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
WEHI-345是一種有效的選擇性RIPK2抑制劑,IC50為0.13μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1354825-58-3 純度:98.56% 分子量:401.46 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
小平菇(秀珍菇)磷化P63腫瘤抑制基因抗體Anti-C9orf72 AntibodyToll樣受體4(TLR4)
小單孢菌磷化P63腫瘤抑制基因抗體Anti-CA1 AntibodyToll樣受體3(TLR3)
橢園釀酒酵母蛋白甘露糖基轉(zhuǎn)移1抗體Anti-CA12 Antibodytoll樣受體2(TLR2)
熱帶假絲酵母磷化嗜中性粒胞漿因子4抗體Anti-CA2 AntibodyToll樣受體1(TLR1)
鴨疫里氏桿菌核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CA4 AntibodyTH糖蛋白(THP)
松針散斑殼磷化核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CA3 Antibody(PB1104)TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)
根瘤菌磷化核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CACNA1C Antibody(PB0394)Tau蛋白(TAU)
威爾酵母磷化核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CA4 AntibodyTau-231蛋白(TAU-231)
謝瓦散囊菌磷化核糖體S6K2蛋白激抗體Anti-CACNA2D2 AntibodyTau-181蛋白(TAU-181)
小克銀漢霉C0磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CACYBP AntibodyTAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP43)
植物乳桿菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CACNA1D Antibody(PB0286)s腺苷同型半胱(SAH)
魚乳桿菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CAD AntibodySyndecan-3/(SDC3)
卷枝毛霉卷枝變型磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CACYBP AntibodySyndecan-1/CD138(SDC1)
毛柄金錢菌(金針菇)磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CALB2 AntibodySTEAP家族成員4(Steap4)
黑曲霉磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CALB1 Antibody(PB0017)STEAP家族成員1(Steap1)
大腸桿菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CADM1 AntibodyStathmin 1(STMN1)
: AS4.252資源名稱: 白黃鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%
: AS4.166資源名稱: 黃色長孢鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:0.98
金頂側(cè)耳Pleurotus│citrinopileatus Singer 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
RIPK2抑制劑(WEHI-345)帚狀曲霉 維生K1神經(jīng)生長因子Elisa
礦泉水 大腸群 醋酸酯紙片神經(jīng)肽YElisa
絲球霉屬 3%過氧化氫試劑嗜酸粒趨化因子Elisa
局限青霉 多粘B(1mg/支*5)嗜酸性粒陽離子蛋白Elisa
首爾紅色桿 Letheen肉湯髓磷脂堿性蛋白Elisa
支氣管敗血波氏 Letheen瓊脂褪黑Elisa
酚節(jié)桿 改良HC瓊脂添加劑維生D3Elisa
大腸埃希 改良HC瓊脂維生D受體Elisa
柱狀假絲酵母 雙料乳糖膽鹽(含中和劑)培養(yǎng)基間粘附分子1Elisa
米根霉 乳糖膽鹽培養(yǎng)基血管活性腸肽Elisa
大豆慢生根瘤 動力-硝酸鹽培養(yǎng)基(B法)血管內(nèi)皮粘附分子1Elisa
嗜酸嗜熱雙歧桿豬亞種 麥芽浸膏瓊脂血清總補體Elisa
草螺 皮膚癬鑒別瓊脂(DTM)血小板活化因子Elisa
釀酒酵母 改良Camp-BAP氏瓊脂添加劑A一氧化氮Elisa
孟氏假單胞 改良Camp-BAP氏瓊脂添加劑B一氧化氮合成Elisa