商品介紹:
Obatoclax是抗凋亡蛋白BCL-2的抑制劑,對抗凋亡蛋白BCL-2的平均IC50值為3μM,包括2.9μM(Mcl-1)和5μM(Bfl-1)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:803712-79-0 別名:Obatoclax Mesylate;GX15-070 純度:99.20% 分子量:413.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:抗凋亡蛋白BCL-2抑制劑(Obatoclax)
英文名稱:Obatoclax
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
釀酒酵母神經(jīng)元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體Human NCOA1(Nuclear receptor coactivator 1) ELISA Kit可溶性髓系觸發(fā)受體-1(sTREM-1)
黃硬皮馬勃MYRIP蛋白抗體Human SLC30A8(Zinc transporter 8) ELISA Kit可溶性瘦受體(sLR)
球孢白僵菌髓磷酯髓鞘蛋白1抗體Human GRIN1(Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 1) ELISA Kit可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)
大豆慢生根瘤菌巨噬克激因子抗體Human SLC25A12(Calcium-binding mitochondrial carrier protein Aralar1) ELISA Kit可溶性磷脂A2(sPL-A2)
單胞菌膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體Human UBAP2(Ubiquitin-associated protein 2) ELISA Kit可溶性間皮相關(guān)肽(SMRP)
鏈格孢肌球蛋白輕鏈激抗體Human FSCN2(Fascin-2) ELISA Kit可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)
木糖駒形氏桿菌單紡錘體蛋白激1抗體Human REG3γ(RegeneRating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)
芽孢桿菌屬有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體Human CDC42(Cell division control protein 42 homolog) ELISA Kit可溶性核因子κB受體活化因子(sRANK)
細(xì)鏈格孢單氧化B抗體Human S1PR2(Sphingosine 1-phosphate receptor 2) ELISA Kit可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)
野油菜黃單胞菌微小染色體維持缺陷蛋白4抗體Human S1PR3(Sphingosine 1-phosphate receptor 3) ELISA Kit可溶性淀粉前體蛋白α(sAPPα)
擬青霉自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體Human S1PR4(Sphingosine 1-phosphate receptor 4) ELISA Kit可溶性蛋白185(sp185/HER-2)
產(chǎn)色鏈霉菌髓鞘基因調(diào)控因子抗體Human LPL(Lipoprotein lipase) ELISA Kit可溶性彈性蛋白片段(sELAF)
淡紫擬青霉肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體Human TAC1(Protachykinin-1) ELISA Kit可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集3(Lgals3)
變天藍(lán)鏈霉菌磷化絲裂原活化蛋白激磷1抗體Human PFN2(Profilin-2) ELISA Kit可溶性白抗原G(sHLA-G)
肉桂鏈霉菌促代謝型谷受體2抗體Human MCAb(Melanocyte antibody) ELISA Kit可溶性白介7受體(sIL-7R)
羊巴貝斯蟲(天祝株)代謝型谷受體-3抗體Human NDN(Necdin) ELISA Kit可溶性P選擇(sP-selectin)
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:700u/mg,羅氏分裝鹽育亨賓
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:98%,標(biāo)準(zhǔn)品木糖
毛霉Mucor│sp. 質(zhì)量規(guī)格:98%,BR七葉皂苷鈉
抗凋亡蛋白BCL-2抑制劑(Obatoclax)惡臭假單胞 3-(三氟甲基)肺絲蟲Elisa
釀酒酵母 3-氟苯乙烯弓形蟲Elisa
樟疫霉 1-氟-4-弓蛔蟲Elisa
葡萄球?qū)?/span> 3-氟-4-羥基血吸蟲抗體Elisa
大肥菇 4-(三氟甲基)芐傳染性胸膜肺炎Elisa
假單胞屬 間三氟乙酮前列腺FElisa
鏈霉 3,5-雙(三氟甲基)魏氏梭(D型)抗體Elisa
陰溝腸桿 三氟磺酸銅(Ⅱ)前列腺F2aElisa
釀酒酵母 3,5-二苯異酸酯前列腺E2Elisa
血鏈球 2,4-二氟溴苯皮質(zhì)Elisa
短裙竹蓀2-1 鄰氟苯痘抗體Elisa
腫大地桿 3--4'-氟苯酮傳染性胸膜肺炎抗體Elisa
白色念珠 5-氟小反芻獸疫Elisa
茶盤長孢* 3-丁基噻吩CD4分子Elisa
雜色曲霉 5-甲氧基-3-乙酸CD8分子Elisa