磷酸甘油酸脫氫酶(PHGDH)抑制劑（NCT-503）公司*的產(chǎn)品：GAPDH(human)/FITC 熒光標(biāo)記3-甘油脫氫(人)抗體IgG2-酰吡 ≥99%,FG,FCC
GAPDH(rat、mouse)/FITC 熒光標(biāo)記3-甘油脫氫（大鼠、小鼠）抗體IgG對(duì)氧芐酯 98%
GAPDH/FITC 熒光標(biāo)記3-甘油脫氫IgG對(duì)氧芐酯 97%,FCC
GAPDH/FITC 熒光標(biāo)記3

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：磷酸甘油酸脫氫酶(PHGDH)抑制劑（NCT-503）

英文名稱：NCT-503

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

海洋伍斯菌大鼠Anti-OR5K3 Antibody人酪羥化(TH)

淡紫褐鏈霉菌大鼠卵清蛋白特異性IgEAnti-OR5M11 Antibody人酪羥化(TH)

七角井鹽單胞菌小鼠神經(jīng)生長因子3Anti-OR5M3 Antibody人多巴脫羧(DDC)

靈芝人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子Anti-OR5M9 Antibody人多巴脫羧(DDC)

果生鏈核盤菌人CD30分子Anti-OR5T3 Antibody人神經(jīng)元性烯化(NNE)

德里腐霉大鼠C型鈉尿肽Anti-OR5V1 Antibody人神經(jīng)元性烯化(NNE)

米曲霉小鼠神經(jīng)生長因子4Anti-OR5P2 Antibody人多巴-β羥化(DBH)

根瘤菌大鼠αS轉(zhuǎn)移Anti-OR6A2 Antibody人多巴-β羥化(DBH)

牛布氏菌陽性血清品（補(bǔ)體結(jié)合）小鼠骨保護(hù)Anti-OR6C2 Antibody人乙?；?CHAc)

釀酒酵母人CXC趨化因子受體1Anti-OR6B2 Antibody人乙酰化(CHAc)

葡萄座腔菌人XC趨化因子受體1Anti-OR5W2 Antibody人異檸檬脫氫(ICD)

金黃殼囊孢菌小鼠B因子Anti-OR6C3 Antibody人異檸檬脫氫(ICD)

葡萄黑腐大鼠同型半胱Anti-OR6C68 Antibody人原Ⅱ(Try-Ⅱ)

皺褶莫氏黑粉菌小鼠抑瘤MAnti-OR6C70 Antibody人原Ⅱ(Try-Ⅱ)

枯草芽孢桿菌大鼠糖皮質(zhì)激受體βAnti-OR6C68 Antibody人腺苷脫(ADA)

雙氮纖維單胞菌人二級(jí)淋巴組織趨化因子Anti-OR6C70 Antibody人腺苷脫(ADA)

Ras特異性鳥核苷釋放因子1弗吉尼亞鏈霉菌615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株

mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體#意大青霉615小鼠肺癌瘤株

核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體#梨生囊殼孢615小鼠滑膜肉瘤瘤株

轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體#大葉黃楊瘡痂病615小鼠乳腺癌瘤株
磷酸甘油酸脫氫酶(PHGDH)抑制劑（NCT-503）巨型艾耳球蟲 蒜糖

蘇云金芽孢桿 桃柁

藤倉赤霉 Methyl ferulate

枯草芽孢桿 4-(Ethoxymethyl)phenol

乳桿屬 桑橙

韓國成對(duì)桿 Ethyl 3-(4-methoxyphenyl)propano

根霉屬 波爾定堿

澳型核果褐腐病 3-甲氧基

血朱栓孔 五味子酯乙

泡盛曲霉變種 五味子甲

鹽水球形 五味子乙

*正紅菇 五味子甲

離褶傘屬 鳶尾苷

燕麥?zhǔn)乘嵫帑渷喎N 鳶尾黃

金龜子綠僵 胡椒堿 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)