產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Akt抑制劑(Perifosine)
英文名稱:Perifosine
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Perifosine是一種有效的Akt抑制劑。Perifosine對絕大多數(shù)細胞具有抗增殖活性,IC50為0.6-8.9μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:157716-52-4 別名:KRX-0401;NSC 639966;D21266 純度:98.00% 分子量:461.66 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Corynebacterium variabile磷化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激結(jié)合蛋白1抗體Human HSF1(Heat shock factor protein 1) ELISA Kit酪酰tRNA合成(YARS)
米根霉磷化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激結(jié)合蛋白1抗體Human PDE5A(cGMP-specific 3′,5′-cyclic phosphodiesterase) ELISA Kit酪酰DNA磷二酯1(TDP1)
薔薇放線孢磷化絲裂原活化蛋白激3抗體Human IFNGR1(Interferon gamma receptor 1) ELISA Kit酪羥化(TH)
海洋青銅小單孢菌磷化絲裂原活化蛋白激激2抗體Human SOX2(Transcription factor SOX-2) ELISA Kit酪激2(Tyk-2)
玫煙色棒束孢磷化肌特異性增強因子2D抗體Human SHBG(Sex hormone-binding globulin) ELISA Kit酪蛋白激受體TYRO3(TYRO3)
大腸埃希氏菌磷化肌特異性增強因子2D抗體Human FGF5(Fibroblast growth factor 5) ELISA Kit狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)
赭色擲孢酵母磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human TAC1(Protachykinin-1) ELISA Kit蘭尼堿受體2(RYR2)
廣東頸槽蛇菌磷化p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激抗體Human HMGB1(High mobility group protein B1) ELISA Kit賴酰氧化(LOX)
鹽地桿菌磷化p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激抗體Human SHBG(Sex hormone-binding globulin) ELISA Kit賴特異性脫甲基5A(JARID1A)
黑曲霉磷化造血祖激抗體Human FGF5(Fibroblast growth factor 5) ELISA Kit萊姆IgG(Lyme-IgG)
微小桿菌p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激抗體Human HMGB1(High mobility group protein B1) ELISA Kit醌NADH脫氫1(NQO1)
小馬勃5-1肌特異性增強因子2D抗體Human FADS2(Fatty acid desaturase 2) ELISA Kit跨膜結(jié)構域4亞家族成員11(MS4A11)
英杜被孢霉磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human MAX(Protein max) ELISA Kit空泡相關蛋白A(VacA)
釀酒酵母磷化蛋白激C底物Marcks抗體Human APH1A(Gamma-secretase subunit APH-1A) ELISA Kit空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)
盤長孢狀盤孢髓易位基因相關蛋白1抗體Human TBX1(T-box transcription factor TBX1) ELISA Kit克雷白氏桿菌(klebsiella)
淡紅擬口蘑巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS6抗體Human PLA2G6(85 kDa calcium-independent phospholipase A2) ELISA Kit克拉拉蛋白(CC16)
海莖狀菌Maricaulis│sp. 質(zhì)量規(guī)格:活1:250,BR蛇床子
ATCC6275=CBS131.52=IMI45551資源名稱: 泡盛曲霉 質(zhì)量規(guī)格:800u/mg原薯蕷皂苷
植物乳桿菌Lactobacillus│plantarum 質(zhì)量規(guī)格:2000u/mg;200萬u/g薯蕷皂苷
Akt抑制劑(Perifosine)白令海芽孢桿 N-芐基酮葡萄糖-6-磷酸Elisa
梨生囊孢殼 (3-溴基)三苯基溴化膦葡萄糖-6-磷酸脫氫Elisa
美澳型核果褐腐病 1,3-二氨基胍鹽酸鹽羥甲基戊二酸單酰Elisa
地衣芽孢桿 菁綠羥甲基戊二酸單酰合成Elisa
親和鏈霉 苯氧乙酸鈉羥脯氨酸Elisa
絲膜屬 9,10-二氫-9-氧雜-10-磷雜菲-10-氧化物乳酸脫氫Elisa
氧化亞鐵酸硫桿(暫不提供) BOC-L-精氨酸鹽酸鹽乳鐵蛋白Elisa
微白諾卡氏 芐基甲基生長Elisa
芽孢桿 Tiglyl Glycine褪黑Elisa
片球?qū)?/span> 三氟磺酸酐維生K1Elisa
Laceyella 2-甲基噻唑纖溶原激活物抑制因子1Elisa
豬鏈球 4-辛基雄Elisa
彎孢 鉻變FB血漿α顆粒膜蛋白Elisa
大腸埃希 五氟酸酐胰島Elisa
庫爾勒海洋桿 膽固硬脂酸酯胰島樣生長因子1Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)