商品介紹:
HO-3867是一個選擇性強的STAT3抑制劑,能夠在不影響STATs.抑制STAT3的磷酸化,轉(zhuǎn)錄,DNA綁定。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1172133-28-6 純度:99.38% 分子量:464.55 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
STAT3抑制劑(HO-3867) | HO-3867 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
硬水黃桿菌內(nèi)臟異位相關(guān)蛋白/鋅指蛋白203抗體Anti-MRP5/ABCC5 Antibody前列腺蛋白類脂肪B(LIPB)
不動桿菌鋅指蛋白913抗體Anti-MRE11 Antibody前膠原賴-2-戊二-5-雙加氧1(PLOD3)
動物雙歧桿菌乳亞種鋅指蛋白450抗體Anti-MS4A1 Antibody(PB0028)前膠原C端蛋白增強子1(PCPE1)
黃硬皮馬勃鋅指蛋白20D3抗體Anti-MSH3 Antibody前動力蛋白受體2(PKR2)
豬布魯氏菌鋅指蛋白BED3抗體Anti-MSH2 Antibody前動力蛋白受體1(PKR1)
固氮菌鋅指蛋白ZBTB38抗體Anti-MSH6 Antibody前動力蛋白2(PK2)
鮑姆木層孔菌鋅結(jié)合乙脫氫結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Anti-MSH6 Antibody前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌9(PCSK9)
毀絲霉屬鋅指蛋白ZBTB3抗體Anti-MSLN Antibody前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌5(PCSK5)
米根霉鋅指蛋白ZBBX抗體Anti-MSI1 Antibody前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌1(PCSK1)
黑曲霉鋅指蛋白219抗體Anti-MSI1 Antibody前催產(chǎn)原(OT)
交鏈孢菌EGF應(yīng)答因子1抗體抗體Anti- Antibody前-B-淋巴基因3(VPREB3)
挪威假絲酵母指蛋白36抗體Anti-MSLN Antibody(PB0312)前-B-淋巴基因1(VPREB1)
乳乳球菌鋅指蛋白347抗體Anti-MST1 Antibody奇異不良(DYSF)
鹽桿菌屬鋅指蛋白BED5抗體Anti-MT-CO1 Antibody普列克底物蛋白同源物樣域家族A成員2(PHLDA2)
米舒青霉鋅指蛋白704抗體Anti-MT-CO1 Antibody普列克底物蛋白2(PLEK2)
扣囊復(fù)膜孢酵母抑癌蛋白5/鋅指蛋白434抗體Anti-MT-ND4 Antibody普列克底物蛋白(PLEK)
唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集抗體拉氏普羅威登斯菌人甲狀腺癌組織源細胞
唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集11抗體舒氏氣單胞菌人乳腺癌組織源細胞
滑膜肉瘤X斷點蛋白5抗體維氏氣單胞菌人肺癌組織源細胞
細胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白1抗體中間葡萄球菌人膠質(zhì)瘤組織源細胞
STAT3抑制劑(HO-3867)竹喙球 甲氧芐啶氨氮Elisa
萊比托游動球 磺甲噁唑二氧化Elisa
球毛殼 慶大霉硫酸鹽半胱雙加氧Elisa
大杯蕈 恩諾沙星半胱次磺酸脫羧Elisa
蠟樣芽孢桿 鄰苯二甲酸二正辛酯磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
假單孢 水楊酸鈉主要組織相容性復(fù)合體Elisa
凍土毛霉 5-胞苷一磷酸二鈉鹽白蛋白Elisa
黑曲霉 5-尿苷一磷酸二鈉鹽總蛋白Elisa
玫瑰色考克氏 聯(lián)苯菊酯11酮睪酮Elisa
Escherichia 鹽酸強力霉乙酰酯Elisa
釀酒酵母 氨曲南S轉(zhuǎn)移Elisa
異常威克漢姆酵母 洛莫司汀血管內(nèi)皮生長因子Elisa
橄欖灰鏈霉 3,5-二羥基分泌型球蛋白AElisa
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞 化乙酰分泌型球蛋白AElisa
猴頭 硫代氨基脲己糖激Elisa