泛WNK-kinase抑制劑(WNK463)公司正在出售的產(chǎn)品：Fc GammaR II /CD32(Human Receptor II for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR II ) ELISA Kit 人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ膽固油酯 85%
Fc GammaR I /CD64(Human Receptor I for the F

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

草色串孢溶菌抗體Human IFITM3(Interferon-induced transmembrane protein 3) ELISA Kit胃抑(GIP)

多座蟲草*LAD1蛋白抗體Human PIAS1 ELISA Kit胃內(nèi)因子(GIF)

黑木耳胸腺生成LAP2抗體Human PIAS2 ELISA Kit胃泌抗體(GCA)

黑曲霉富含亮重復(fù)蛋白6抗體Human PIAS3 ELISA Kit胃泌釋放肽前體(ProGRP)

地下節(jié)桿菌低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白12抗體（抑制腫瘤蛋白7）Human PIAS4 ELISA Kit胃泌釋放多肽(GRP)

解淀粉芽孢桿菌磷化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體Human PHLDA1 ELISA Kit胃泌(Gastrin)

枯草芽孢桿菌低密度脂蛋白受體抗體Human PHLPP ELISA Kit胃泌(GAS)

瘦抗體Human PHLDA2 ELISA Kit胃動(MTL)

小鏈霉菌腫瘤自身抗原LMO4抗體Human PHLPPL ELISA Kit胃動蛋白2(GKN2)

繩生毛殼淋巴特異性蛋白酪激抗體Human LRP8(Low-density lipoprotein receptor-related protein 8) ELISA Kit胃蛋白原C(PG-C)

釀酒酵母白免疫球蛋白樣受體8抗體Human PGRMC2 ELISA Kit胃蛋白原A(PG-A)

黑木耳(186)白三烯B4受體1抗體Human PHKA2 ELISA Kit胃蛋白(PP)

巨大芽孢桿菌白免疫球蛋白樣受體6抗體Human PHACTR4 ELISA Kit胃蛋白(PG)

Candida淋巴活化基因-3抗體Human PHACTR1 ELISA Kit胃蛋白(GT)

變平滑假絲酵母白相關(guān)免疫球蛋白樣受體1抗體Human PHAX ELISA Kit未甲基化寡聚脫氧核苷(CpG-ODN)

柴油食烷菌白分化抗原CD207抗體Human MUSK(Muscle, skeletal receptor tyrosine-protein kinase) ELISA Kit尾肢同源蛋白2(PYGO2/PP7910)

金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T)土貝母苷

嘴突凸臍蠕孢Exserohilum│rostratum 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)柴胡皂苷B2

葉氏假交替單胞菌Pseudoalteromonas│elyakovii 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)柴胡皂苷B1
泛WNK-kinase抑制劑(WNK463)香菇 4-氨基-3-氟苯甲三磷酸核苷磷酸二酯1Elisa

大腸埃希 2--4-苯IgG抗體Elisa

釀酒酵母 1,1,1,2-四乙烷標(biāo)準(zhǔn)溶液IgA抗體Elisa

黃傘 基乙IgM抗體Elisa

中孢短芽孢桿 2-甲基-3-甲硫基呋喃輪狀病IgM抗體Elisa

普雷恩毛霉 二十五烷輪狀病IgA抗體Elisa

芹側(cè)耳（杏鮑菇） 十六烯輪狀病IgG抗體Elisa

哈氏弧 4--3-三氟酚超氧化物歧化Elisa

凍土毛霉 十五烷舌抗肽Elisa

谷氨酸棒桿 十五烷焦蟲病抗體Elisa

茄病鐮刀 (甲酰甲基)三苯基化磷β2微球蛋白Elisa

粘質(zhì)沙雷氏 1,8-辛二總蛋白Elisa

美澳型核果褐腐病 基二硫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷Elisa

總狀共頭霉 3-甲氨基蘋果酸脫氫Elisa

擬莖點霉 1,6-二溴己烷肉堿脂酰轉(zhuǎn)移Elisa