產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):NF-κB活化抑制劑(QNZ)
英文名稱(chēng):QNZ
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
QNZ(EVP4593)是6-氨基喹唑啉衍生物,能抑制PMA/PHA誘導(dǎo)的NF-κB活化,IC50為9nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):545380-34-5 別名:EVP4593 純度:99.00% 分子量:356.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
平菇三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體Human LY96 ELISA Kit豬生長(zhǎng)激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)免疫試劑盒
黃青霉載脂蛋白B抗體Human LYPLA1 ELISA Kit豬生長(zhǎng)激(GH)免疫試劑盒
殺鮭氣單胞菌花生四烯15脂氧合2抗體Human LYPLAL1 ELISA Kit豬生長(zhǎng)分化因子9(GDF9)免疫試劑盒
變幻青霉載脂蛋白C4抗體Human LYRM7 ELISA Kit豬腎(Renin)免疫試劑盒
污黑腐皮殼低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體Human LY6K ELISA Kit豬腎上腺(EPI)免疫試劑盒
淺金鏈霉菌原始廣泛存在蛋白1抗體Human LYAR ELISA Kit豬神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS)免疫試劑盒
血紅紅曲霉錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體Human LY96 ELISA Kit豬神經(jīng)特異性烯化(NSE)免疫試劑盒
黑曲霉α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移1Human LYN ELISA Kit豬神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)免疫試劑盒
枝狀枝孢血管緊張Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體Human LYG1 ELISA Kit豬色上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒
中國(guó)節(jié)叢孢膜粘連蛋白2受體抗體Human LYPLA1 ELISA Kit豬狀腺原(T3)免疫試劑盒
麥?zhǔn)辖惶鎲伟芫o張1轉(zhuǎn)換抑制劑抗體Human LYRM7 ELISA Kit豬乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒
嗜管歐文氏菌拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體Human LYPLAL1 ELISA Kit豬乳脫氫(LDH)免疫試劑盒
豬丹絲菌α-1抗胰糜蛋白抗體Human LUC7L ELISA Kit豬熱休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)免疫試劑盒
棒曲霉α-1抗抗體Human LSM5 ELISA Kit豬熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒
變平滑假絲酵母ATP結(jié)合蛋白家族6抗體Human LUC7L2 ELISA Kit豬熱休克蛋白60,線粒體(HSPD1/Hsp-60)免疫試劑盒
黑木耳8808三磷腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體Human LSM7 ELISA Kit豬熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒
腸桿菌Enterobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>95% (HPLC),BC補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1試劑盒澤蘭黃
鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>95%,Tech Grade補(bǔ)體因子H試劑盒紫羅蘭
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR補(bǔ)體因子B前體試劑盒支脫皂苷元
NF-κB活化抑制劑(QNZ)組蛋白去乙?;?/span>2抗體(-)-丁香樹(shù)脂酚-4-O-β-D-葡萄糖苷 Besifloxacin HCl
人乙肝病Large S蛋白抗體(2R)-5,7-二氧二氫黃 Betaine
HER4抗體(2R,3R)-3,7,4'-三羥-5-氧-8-... Betaine
原因1/bri3結(jié)合蛋白抗體(2R,3S)-3,7,4'-三羥-5-氧-8-... Uric acid
肝病核心抗原C區(qū)抗體(7S,7'R)-雙(3,4-亞二氧)-rel-... Uric acid
型肝炎病-NS1抗體(E)-N-Caffeoylputrescine Domiphen bromide
型肝炎病-NS3抗體(R,S)-告依春 Betaine monohydrate
型肝炎病-NS4a抗體(R型)人參皂苷Rg2(標(biāo)準(zhǔn)品) Naphthol AS-D acetate
A型病H5N1-M2蛋白抗體(R型)人參皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Zinc protoporphyrin
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)