鞘氨醇激酶(SK)抑制劑(SKI II)公司正在出售的產(chǎn)品：GADD45/FITC 熒光標(biāo)記生長(zhǎng)抑制DNA損傷因45抗體IgG二氧化雙環(huán)戊二烯(內(nèi)型和外型異構(gòu)體混合物） 97%
GADD153/FITC 熒光標(biāo)記生長(zhǎng)抑制DNA損傷因153抗體IgG正戊 GCS, ≥99.5% (GC)
Galanin/FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)節(jié)肽抗體“甘肽"IgG正戊 高純級(jí)，>99.5%(GC)
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以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

產(chǎn)短桿菌人凋亡相關(guān)因子配體Anti-OR5AU1 Antibody人α烯化(αENOL)

根瘤菌大鼠原激活肽Anti-OR5AU1 Antibody人α烯化(αENOL)

白布勒擔(dān)孢酵母大鼠補(bǔ)體因子HAnti-OR5B12 Antibody人膠原II(Collagenase II)

產(chǎn)氣腸桿菌人凋亡相關(guān)因子Anti-OR5B3 Antibody人膠原II(Collagenase II)

放射桿狀根瘤菌小鼠CD8分子Anti-OR5F1 Antibody人膠原I(Collagenase I)

果生鏈核盤(pán)菌人E選擇Anti-OR5H1 Antibody人膠原I(Collagenase I)

解淀粉芽孢桿菌植物亞種大鼠膀胱腫瘤抗原Anti-OR5D13 Antibody人磷化蛋白激C(P-PKC)

大腸桿菌小鼠CD25分子Anti-OR5D16 Antibody人磷化蛋白激C(P-PKC)

豬鏈球菌人嗜粒趨化蛋白Anti-OR5H15 Antibody人磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)

假單胞菌小鼠CD20分子Anti-OR5H15 Antibody人磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)

橡膠疫霉大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BBAnti-OR5H6 Antibody人磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)

地衣芽孢桿菌小鼠CD14分子Anti-OR5I1 Antibody人磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)

克魯維尼爾巴克酵母大鼠胃蛋白Anti-OR5K1 Antibody人乙酰酯(AChE)

洲黑蛋巢人鼠嗜粒趨化因子Anti-OR5M1 Antibody人乙酰酯(AChE)

南類(lèi)芽孢桿菌小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子Anti-OR5L1 Antibody人葡萄糖氧化(GOD)

大腸埃希氏桿菌人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子Anti-OR5M1 Antibody人葡萄糖氧化(GOD)

乳腺癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體豬屎豆根瘤菌人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞

染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體#姬菇人甲狀腺癌細(xì)胞ACT-1（干細(xì)胞庫(kù)保藏）

受體結(jié)合絲蘇激2抗體黃硬皮馬勃人低分化肺腺癌細(xì)胞

孤兒核受體抗體#桑葉刺盤(pán)孢人耐VP16絨癌細(xì)胞株
鞘氨醇激酶(SK)抑制劑(SKI II)釀酒酵母 甲氧呋豆

塔賓曲霉 櫻黃

圈卷產(chǎn)色鏈霉淺色變種 Isoelemicin

*櫻桃鏈格孢 Ethyl orsellinate

三聚對(duì)照液 2,4-二羥基-3,6-酸甲酯，橡苔

釀酒酵母  beta-香樹(shù)精樹(shù)精

豬布魯氏 生物Ⅱ型 大豆甾B

白布勒擔(dān)孢酵母 Sitostenone

新疆鹽地桿 松脂，松脂，松脂

深褐毛殼 Methyl sinapate

酮丁梭 3,4-二甲氧基-5-羥基甲酯

蘇云金芽胞桿 秦艽甲

東方伊薩酵母 過(guò)氧麥角甾

黑綠青霉 阿福豆苷

冷卻劑四合球 3-苯基-2-烯-1-