詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)紫外分光光度法
規(guī)格:50管/48樣
測(cè)試方法:紫外分光光度法
分類:三羧酸循環(huán)系列
貨號(hào):GOY-01S6586
客戶自備儀器和試劑
商品介紹:
測(cè)定意義 MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細(xì)胞中,NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。 測(cè)定原理: MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
特點(diǎn): 1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成 2、靈敏度高,操作便捷 3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑 | 儀器: 1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm) 2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃) 3、臺(tái)式離心機(jī) 4、漩渦混勻器 5、微量移液器 |
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:
1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品的制備 :
細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每100萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測(cè)。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的處理:稱取1mg,將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒量杯 軟質(zhì)草死 分析標(biāo)準(zhǔn)品多聚 CP,94.0%
小鼠黑色素抗體(MC Ab)試劑盒量杯氘代二氫萘 分析標(biāo)準(zhǔn)品多聚 96%
小鼠黑色素抗體(MC Ab)試劑盒痰杯苊烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%(GC)1,4-環(huán)己烷二(順+反異構(gòu)體混合物) 99%
小鼠狀腺素(T4)試劑盒三色藥杯1,3-丁二烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品N,N-二乙酰 ≥99.8%
小鼠狀腺素(T4)試劑盒試劑瓶苯菌靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品N,N-二乙 99.0%
小鼠二肽肽Ⅳ(DPPⅣ)試劑盒試劑瓶丁草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,95%二乙 超純級(jí),≥99.5%(GC)
小鼠二肽肽Ⅳ(DPPⅣ)試劑盒試劑瓶炔草隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品二乙 Standard for GC, ≥99.7% (GC)
小鼠過(guò)敏素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)試劑盒試劑瓶苯并[g,h,i]芘 分析標(biāo)準(zhǔn)品二乙 CP,98%
小鼠過(guò)敏素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)試劑盒試劑瓶Celite® 硅藻土545 助濾劑,碳鈉處理,通量煅燒二乙 AR,99%
小鼠三狀腺原氨(T3)試劑盒試劑瓶環(huán)沙星 分析標(biāo)準(zhǔn)品二乙 ACS, ≥99.0% (GC)
小鼠三狀腺原氨(T3)試劑盒方形試劑瓶環(huán)莠隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品氧化二丁錫 98%(劇品)
小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)試劑盒圓形果蠅瓶枯草隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品氧化二丁錫 分析標(biāo)準(zhǔn)品(劇品)
小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)試劑盒方形試劑瓶綠麥隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品氧化二辛錫 98%
小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)試劑盒不透明 閃爍瓶順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙 AR,99%
小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)試劑盒透明 閃爍瓶鄰苯二二丁酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙 CP,98%
小鼠17羥孕(17-OHP)試劑盒吸液槽1,2-標(biāo)準(zhǔn)溶液100mg/L,溶劑:乙 色譜固定液,30℃
線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)紫外分光光度法猴肝配蛋白A受體3 (EPHA3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒S-1-芐氧羰-3-羧吡咯莖生擬莖點(diǎn)霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴γ1肌動(dòng)蛋白(ACTG1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒S-1-芐氧羰-3-羧吡咯微小毛霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴I型前膠原羧端原肽(PICP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(R)-(-)-1-Cbz-3-羥吡咯烷Rhizobium multihospitium拉丁屬名: Pseudomonas eucalypticola
猴血管活性腸肽(VIP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(R)-(-)-1-Cbz-3-羥吡咯烷Pseudomonas eucalypticola注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 三硅烷磺酯樹(shù)舌1-2拉丁屬名: Bacillus pumilus
猴膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Daclatasvir (BMS-790052)短小芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus pumilus
猴嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CYPB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 苯戊短小芽孢桿菌拉丁屬名: Annulohypoxylon multiforme
猴白介素12 p40(IL-12 p40)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒苯戊多形環(huán)紋炭團(tuán)菌拉丁屬名: Gordonia amicalis
猴載脂蛋白A2(ApoA2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 苯戊友好戈登氏菌拉丁屬名: Lactobacillus helveticus
猴β干擾素(IFN-β)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-氟-3-瑞士乳桿菌拉丁屬名: Candida maltosa
猴DNA結(jié)合蛋白(DBP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 4-氟-3-麥芽糖假絲酵母拉丁屬名: Neurospora crassa
猴核糖核T2(RNASET2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒水蘇四糖,四水粗糙脈孢菌拉丁屬名: Xanthomonas campestris pv. holcicola
猴軟骨寡聚質(zhì)蛋白(COMP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 一氧化硅德夸菌素鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴絨毛蛋白(CVL/EZR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 一氧化硅禾谷絲核菌拉丁屬名: Lecanicillium dimorphum
猴破骨相關(guān)受體(OSCAR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒化鑭,無(wú)水兩型蠟蚧菌拉丁屬名: Clavispora lusitaniae
猴半乳凝集素14(GAL14)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒化鑭,無(wú)水葡萄牙棒孢酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。