產品屬性:
中文名稱:CDK抑制劑
英文名稱:AT7519 Hydrochloride
產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
AT7519 Hydrochloride是一種有效的CDK抑制劑,對CDK1,CDK2,CDK4-CDK6以及CDK9的IC50值分別為210,47,100,13,170和<10nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:902135-91-5 純度:98.90% 分子量:418.71 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
維羅納假單胞菌DNA補充修復XPC蛋白抗體Anti-MMP24 Antibody強啡肽原(PDYN)
大腸埃希氏菌DNA損傷修復ERCC3蛋白抗體Anti-MMP28 Antibody嵌套蛋白(NES)
松口蘑X射線修復交叉互補蛋白3抗體Anti-MMP7 Antibody嵌合蛋白2(CHN2)
枯草芽孢桿菌X射線修復交叉互補蛋白4抗體Anti-MMP3 Antibody嵌合蛋白1(CHN1)
乙型肝炎病X蛋白反轉錄蛋白4抗體Anti-MMP3 Antibody前折疊蛋白亞基6(PFDN6)
紫紅曲霉鈣離子通道阻端耐藥蛋白CCBR1抗體Anti-MMP7 Antibody(PB0071)前折疊蛋白亞基5(PFDN5)
植物乳桿菌植物亞種X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體Anti-MMP7 Antibody(PB0070)前折疊蛋白亞基4(PFDN4)
高溫放線菌科未定屬核轉錄因子X盒結合蛋白抗體Anti-MMP8 Antibody前折疊蛋白亞基3(PFDN3)
環(huán)狀芽胞桿菌乙型肝炎病X蛋白HBX抗體Anti-MMP8 Antibody前折疊蛋白亞基2(PFDN2)
薔薇放線孢*乙型肝炎病X蛋白HBX抗體Anti-MMP8 Antibody前折疊蛋白亞基1(PFDN1)
粗糙脈孢菌XAB2蛋白抗體Anti-MMP9 Antibody前胰淀粉樣蛋白(ProIAPP)
健康皮張抗原(豬皮1)氧化抗體Anti-MMP8 Antibody前胸腺α(PTMα)
雷丸*腫瘤/抗原12家族2抗體Anti-MMP9 Antibody前庭蛋白1(VEST1)
土地芽孢桿菌膜轉運蛋白XK抗體Anti-MMP9 Antibody前梯度蛋白2(AGR2)
弗氏弧菌磷化14-3-3E蛋白抗體Anti-MMP9 Antibody(PB0710)前蛋白關聯(lián)內膜蛋白(PAEP)
弗雷德里克斯堡假單胞菌14-3-3E蛋白抗體Anti-MNAT1 Antibody前腦啡肽(PENK)
基質細胞衍生因子4抗體鈣結合蛋白水井坊基桿菌人結腸癌組織源細胞
蛋白剪接變異體蛋白抗體冠突散囊菌人食管癌組織源細胞
分泌和跨膜蛋白1抗體放射型根瘤菌人胃癌組織源細胞
纖溶原激活物抑制劑1RNA結合蛋白抗體Massiliakyomggiensis人肝癌組織源細胞
CDK抑制劑黑木耳 二苯并噻吩三磷酸腺苷Elisa
異配囊接霉卵孢變種 磺苯甲?;青奏lisa
西溪土土地桿 磺乙酰鈉單不飽和脂肪酸Elisa
豌豆根瘤 磺二甲氧嘧啶多不飽和脂肪酸Elisa
鍺栓孔 2,6-二苯脂聯(lián)Elisa
黑曲霉 苯佐抵抗Elisa
類芽孢桿屬 去甲替林鹽酸鹽膽囊收縮Elisa
產黃青霉 鹽酸阿米替林甘油三酯Elisa
阿爾賓娜鞘氨單胞 1-氨基環(huán)烷羧酸高密度脂蛋白Elisa
空腸彎曲桿* 4-松油低密度脂蛋白Elisa
芽胞桿 泰妙游離脂肪酸Elisa
根瘤 麥芽五糖糖化血紅蛋白Elisa
大球蓋菇 β-丁香烯末端糖基化Elisa
密蘇里游動放線 卡托普利還原Elisa
腐皮鐮孢 甲芬那酸黑色Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)