公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:c-MET激酶抑制劑(INCB28060)
英文名稱:INCB28060
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
INCB28060是一種有效的選擇性c-MET激酶抑制劑。INCB28060抑制c-MET激酶活性,平均IC50為0.13nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1029712-80-8 別名:Capmatinib;INC-280 純度:99.78% 分子量:412.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
羅氏鏈霉菌磷化蛋白激C mu型抗體Anti-c-Fos/FOS Antibodyvav3鳥嘌呤核苷交換因子(VAV3)
金黃色葡萄球菌前纖維蛋白1抗體Anti-Bub1 AntibodyUV切除修復(fù)蛋白R(shí)AD23同源物A(RAD23A)
總狀毛霉增殖核抗原抗體Anti-BUB3 AntibodyU1小核核糖核蛋白A(SNRPA)
枯草芽孢桿菌磷化粘著斑激抗體Anti-C-SKI(SKI) AntibodyT特異性鳥苷三磷(Tgtp)
三葉草根瘤菌磷化粘著斑激抗體Anti-C1QBP AntibodyT受體(TCR)
密二糖假絲酵母磷化p21激活激1抗體Anti-C3 AntibodyT急性淋巴母白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)
泡盛曲霉磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體Anti-C3(Complement C3) AntibodyT活化連接蛋白(LAT)
蠟狀芽孢桿菌磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體Anti-C4A(Complement C4-A) AntibodyT表面糖蛋白CD1a(CD1A)
球孢白僵菌磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體Anti-C5 AntibodyTU3A蛋白(TU3A)
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種磷化磷酯Cγ1抗體Anti-C5 AntibodyTrem樣轉(zhuǎn)錄因子1(TREML1)
大豆慢生根瘤菌磷化磷酯Cγ2抗體Anti-C5a-R/C5ar1 AntibodyTraf2結(jié)合蛋白(T2BP)
卷枝毛霉卷枝變型磷化樁蛋白Paxillin抗體Anti-C5 AntibodyToll作用蛋白(TOLLIP)
松雙毛殼孢磷化樁蛋白Paxillin抗體Anti-C7 AntibodyToll樣受體9(TLR-9/CD289)
根瘤菌磷化樁蛋白Paxillin抗體Anti-C9 AntibodyToll樣受體7(TLR7)
平凡假單胞菌磷化蛋白激C β1/β2(Thr500)抗體Anti-C9 AntibodyToll樣受體6(TLR6)
植物乳桿菌植物亞種孕激受體膜相關(guān)元件抗體Anti-CA1 AntibodyToll樣受體5(TLR5)
稻生黃單胞菌(無(wú)法提供)Xanthomonas│oryzae pv.oryzae (Ishiyama) 質(zhì)量規(guī)格:0.97
皮氏無(wú)色桿菌Achromobacter│piechaudii 質(zhì)量規(guī)格:0.97
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:0.98
c-MET激酶抑制劑(INCB28060)新月梅奇酵母 抗氧劑1076巨噬炎性蛋白-1αElisa
樟疫霉 2-噻吩乙卵清蛋白特異性IgE抗體Elisa
盞芝小孔 5-溴吡啶-3-甲酸球蛋白EElisa
E.coli DB3.1 3-延胡酸氨基酯球蛋白GElisa
芭蕉本森頓酵母 2-溴異丁酰溴球蛋白MElisa
河北鏈霉 (R)-(-)-扁桃酸甲酯膜攻擊復(fù)合物Elisa
秦氏蜜環(huán) 5-溴戊酸內(nèi)皮1Elisa
大豆慢生根瘤 3-氨基苯酸內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1Elisa
諾爾斯氏鏈霉 苯氧乙酸甲酯黏蛋白Elisa
產(chǎn)氮假單胞 4-丁基前列環(huán)Elisa
釀酒酵母 水楊酸丁酯前列腺E2Elisa
鮭色鎖擲酵母 2-溴聯(lián)苯前列腺特異性抗原Elisa
小麥全蝕病 MRS肉湯羥脯氨酸Elisa
節(jié)桿 雙歧桿BS培養(yǎng)基趨化因子配體21Elisa
美麗鹽單胞 化血紅趨化因子配體25Elisa