公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MEK1和MEK2抑制劑
英文名稱:Trametinib DMSO solvate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:Trametinib DMSO solvate 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg Trametinib DMSO solvate是一種有效的MEK1/2抑制劑,特異性抑制MEK1/2,IC50約為2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1187431-43-1 別名:GSK-1120212 DMSO solvate;Trametinib;JTP-74057;GSK1120212 純度:98.53% 分子量:693.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
大腸埃希氏桿菌卷曲蛋白6抗體Human ZC3H4 ELISA Kit雞睪(T)免疫試劑盒
三線鐮刀菌卷曲蛋白8抗體Human ZDHHC9 ELISA Kit雞甘油-3-磷脫氫(GAPDH)免疫試劑盒
北京擲孢酵母FSD1蛋白抗體Human ZDHHC7 ELISA Kit雞甘肽(GAL)免疫試劑盒
ATCC 700425卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體Human ZBP1 ELISA Kit雞鈣結(jié)合蛋白(CALB2)免疫試劑盒
哈茨木霉Prader-Willi綜合征相關(guān)蛋白抗體Human ZBTB11 ELISA Kit雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)免疫試劑盒
釀酒酵母AKT相互作用蛋白蛋白抗體Human ZBTB25 ELISA Kit雞肺炎支原體(MP)抗體(IgG)免疫試劑盒
發(fā)光假蜜環(huán)菌DNA解旋V抗體Human YPEL5 ELISA Kit雞多巴(DA)免疫試劑盒
豇豆慢生根瘤菌遠端上游元件結(jié)合蛋白3抗體Human LGMN(Legumain) ELISA Kit雞凋亡相關(guān)因子(FAS)免疫試劑盒
紫皮蘑巖藻糖變旋抗體Human YTHDC1 ELISA Kit雞低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒
樊氏鹽單胞菌X三體綜合征相關(guān)蛋白FUNDC1抗體Human ZBTB37 ELISA Kit雞的牛血清白蛋白(BSA)免疫試劑盒
芽胞桿菌弗林蛋白抗體Human YTHDF1 ELISA Kit雞膽囊收縮A受體(CCKAR)免疫試劑盒
小弧菌富含絲/精重復(fù)結(jié)構(gòu)蛋白抗體Human YTHDF2 ELISA Kit雞單純皰疹?、蛐涂贵w(HSVⅡ-Ab)免疫試劑盒
矮棒曲霉巖藻糖基轉(zhuǎn)移6抗體Human ZBTB38 ELISA Kit雞催乳(PRL/LTH)免疫試劑盒
擬青霉巖藻糖基轉(zhuǎn)移7抗體Human ZBTB40 ELISA Kit雞促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒
橙黃硬皮馬勃眼睛和頭發(fā)顏色相關(guān)蛋白FUZ抗體Human ZBTB44 ELISA Kit雞促卵泡(FSH)免疫試劑盒
短柄帚霉濾泡型轉(zhuǎn)運蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗體Human YTHDF3 ELISA Kit雞促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml in 10% HCl金合歡;槐
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3大黃酚-8-O-葡萄糖苷
: AS3.3390資源名稱: 淡紫犁頭霉 質(zhì)量規(guī)格:100µg/ml,,基體:1%HNO3正丁基酞;丁基酞內(nèi)酯
MEK1和MEK2抑制劑科氏梭 1-庚硫單氧化Elisa
黑曲霉 (R)-4-Boc-2-甲基哌酪氨酸Elisa
溶桿 β-糖轉(zhuǎn)鐵蛋白Elisa
粗壯木霉 3,4,5-三氟苯腸炎沙門氏抗體Elisa
冬蟲夏草 N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-D-色氨酸傳染性貧血病Elisa
紅色白環(huán)菇 4,6-二甲基-2-(易)低密度脂蛋白膽固Elisa
龜裂鏈霉 4-氨基-嘧啶-5-單核趨化蛋白1Elisa
釀酒酵母 (3R,4R)-(-)-1-芐基-3,4-吡咯烷二環(huán)氧合2Elisa
枯草芽孢桿 N-Boc-(R)-3-甲酸鈣敏感受體蛋白Elisa
匍枝根霉(黑根霉) (S)-(-)-2-氨基-4-戊烯酸高遷移率族蛋白AElisa
貝萊斯芽胞桿 3-烷磺酰前列腺E2Elisa
馬葡萄球 6-巰基己色C氧化Elisa
瑟氏泰勒蟲(盧氏株-2) 4-乙基苯甲酰碳酸酐4Elisa
枯草芽孢桿 N-并咪唑安卡拉病抗體Elisa
糞腸球 Gamma-Linolenic Acid Methyl Ester 99%胰蛋白Elisa