血管生成抑制劑(E7820)公司*的產(chǎn)品：LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit 兔子促黃體激氫 GR
ABAb (Rabbit brain tissue antibody) ELISA Kit 兔抗腦組織抗體氫 ACS
p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit 兔p53二氫 99.99% metals

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：血管生成抑制劑(E7820)

英文名稱：E7820

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

橄欖綠鏈霉菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XPC Antibody叢狀蛋白C1(PLXNC1)

青春雙歧桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XPO1 Antibody叢狀蛋白B3(PLXNB3)

海藻希瓦氏菌PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XPO5 Antibody叢狀蛋白B2(PLXNB2)

圈卷產(chǎn)色鏈霉菌淡色變種堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC1 Antibody叢狀蛋白B1(PLXNB1)

豬屎豆根瘤菌FITC標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC1 Antibody叢狀蛋白A4(PLXNA4)

雜色曲霉羅丹明標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC1 Antibody叢狀蛋白A3(PLXNA3)

蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC3 Antibody叢狀蛋白A2(PLXNA2)

美澳型核果褐腐病菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC2 Antibody叢狀蛋白A1(PLXNA1)

豬丹絲菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC3 Antibody猬因子相互作用蛋白(HHIP)

雅致栓孔菌Cy7標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC4 Antibody(PB0954)猬?；D(zhuǎn)移(HHAT)

東方伊薩酵母羅丹明標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-Xrcc4 Antibody核糖基轉(zhuǎn)移1(HPRT1)

白淺灰鏈霉菌FITC標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC2 Antibody雌(E1)

納瓦河部落奇異球菌堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC5 Antibody雌激受體相關(guān)受體α(ERRα)

綠色鏈霉菌膠體金標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC5 Antibody(PB0411)雌激受體β(ERβ)

小孔異擔(dān)子菌Cy3標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC5 Antibody雌激受體α(ERα)

洛格酵母Cy5標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-YBX1 Antibody垂體腫瘤轉(zhuǎn)化1相互作用蛋白(PTTG1IP)

磷化絲/蘇/酪抗體嗜鹽細(xì)菌屬小鼠脈絡(luò)膜組織提取物

核仁同源蛋白17抗體睪丸叢毛單胞菌小鼠角膜組織提取物

蛋白酪磷相互作用蛋白51抗體新鞘單胞菌小鼠腦靜脈血管組織提取物

前列腺相關(guān)P抗原家族成員1抗體蜃樓耶爾森氏菌小鼠嗅鞘組織提取物
血管生成抑制劑(E7820)釀酒酵母 Vitexdoin A

玫瑰色紅球 Alstonic acid A

白靈側(cè)耳 Neoprzewaquinone A

節(jié)桿屬 Sventenic acid

哈茨木霉 Mirabijalone D

果生鏈核盤(pán) Chlorantholide B

蘇云金芽孢桿山東亞種 Chlorantholide A

枯草芽孢桿(斜面10個(gè)工作日凍干管25-30個(gè)工作日) 7,2'-Dihydroxy-5,8-dimethoxyflav

梨生囊殼孢 11-Hydroxyrankinidine

施氏假單胞 11-Hydroxygelsenicine

釀酒酵母 Bi-linderone

黃棕鏈霉 Yunnandaphninine G

蠟狀芽孢桿 瓦來(lái)薩明堿 N-氧化物

馬腺疫鏈球獸疫亞種 Sulfocostunolide B

類干酪乳桿 銀線草 D 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)