DUB抑制劑(PR-619)公司正在出售的產(chǎn)品：OPG (Rabbit Osteoprotegerin) ELISA Kit 兔骨保護(hù)四草，二水 PT
Amylin (Rabbit Amylin ) ELISA Kit 兔胰淀油 CP
cTn- I (Rabbit cardiac troponin I ) ELISA Kit 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ氫 AR，99.8%
RANKL (Rabbit

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

枯草芽孢桿菌膠體金標(biāo)記的兔抗大鼠IgMAnti-Wnt8a Antibody代謝型型谷受體3(GRM3)

金黃色葡萄球菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgMAnti-XAF1 Antibody大型中性基轉(zhuǎn)運蛋白1(LAT1)

伯頓生絲畢赤酵母Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgMAnti-XAF1 Antibody大型多功能肽7(LMP7)

平菇PE標(biāo)記的兔抗大鼠IgMAnti-XAF1 Antibody受體1(CNR1)

香菇PE-Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgMAnti-WRN Antibody存活(Surv)

枯草芽孢桿菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗大鼠IgMAnti-XAF1 Antibody脆性X智力遲鈍蛋白1(FMR1)

毛栓孔菌辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗大鼠IgMAnti-WWOX Antibody催乳受體(PRLR)

芽胞桿菌生物標(biāo)記的兔抗大鼠IgMAnti-XBP1 Antibody(PB0487)簇集蛋白(CLU)

擴展青霉Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgMAnti-XCL1 Antibody促胰液受體(SCTR)

大邱螯合球菌Cy5標(biāo)記的兔抗大鼠IgMAnti-XCL1 Antibody促胰液(SCT)

慢生根瘤菌PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XCL1 Antibody促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)

肉桂色乳菇APC標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XDH Antibody促腎上腺皮質(zhì)釋放激結(jié)合蛋白(CRHBP)

麥根腐平臍蠕孢Cy3標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XPA Antibody促腎上腺皮質(zhì)激樣中葉肽(CLIP)

矩圓黑盤孢Cy5標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XDH Antibody促泌(SCGN)

扁平鏈霉菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XIAP Antibody促凋亡蛋白1(APOPT1)

大腸埃希菌Cy7標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XIAP Antibody叢狀蛋白D1(PLXND1)

蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)抗體水螺菌小鼠皮下脂肪組織提取物

脯酰羥化抗體腸炎沙門氏菌腸炎亞種小鼠胎兒真皮組織提取物

棕櫚酰蛋白硫酯1抗體萎蔫短小桿菌小鼠視網(wǎng)膜組織提取物

富含脯蛋白11抗體海藻希瓦氏菌小鼠晶狀體組織提取物
DUB抑制劑(PR-619)合適檸檬酸桿 5-腺苷一磷酸二鈉鹽

淡紫擬青霉 多索茶堿

雜色曲霉 (1R)-(-)-桃金娘烯

四脊裸胞殼 蛔蒿

根瘤 優(yōu)葛縷酮

假單胞屬 法莫替丁

釀酒酵母 纈草

斑污擬盤多孔孢 Linderaspirone A

蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種 Guajadial B

熱帶假絲酵母 Millewanin H

墨西哥諾卡氏 Millewanin G

淺紫灰鏈霉蠶膿亞種 番石榴二

無 Gelsempervine A

長柄鏈格孢 長春堿衍生物

棒狀乳桿棒狀亞種 4,5-Diepipsidial A