不可逆抑制劑(Pentostatin)公司*的產(chǎn)品：TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) 腫瘤壞死因子-β抗原二, 含穩(wěn)定劑銅屑, 98%
TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗原N,N-二酰 98%
TP53(tumor protein p53； L

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：不可逆抑制劑(Pentostatin)

英文名稱：Pentostatin

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

細(xì)枝孢甘脫羧P蛋白抗體Human THRSP ELISA Kit大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫試劑盒

耐輻射奇球菌核孔蛋白GLE1抗體Human SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) ELISA Kit大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(AMH)免疫試劑盒

交替紅色桿菌屬腎小球上皮蛋白1抗體Human THTPA ELISA Kit大鼠免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒

柱孢菌屬轉(zhuǎn)錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4抗體Human THUMPD3 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒

小棱盤菌麥角蛋白抗體Human TICAM2 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒

多主葡萄殼菌膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白1抗體Human TIGD5 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒

溶淀粉類芽孢桿菌糖基轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域1/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移1抗體Human THUMPD1 ELISA Kit大鼠絡(luò)(TYR)免疫試劑盒

油菜菌核病菌谷酰酰水解抗體Human TIGD1 ELISA Kit大鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒

乳白耙菌糖基轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域2/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移2抗體Human TIMELESS(Protein timeless homolog) ELISA Kit大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒

大腸埃希菌糖基轉(zhuǎn)移28家族1抗體Human THOC7 ELISA Kit大鼠卵泡抑(FS)免疫試劑盒

東方伊薩酵母糖基轉(zhuǎn)移6結(jié)構(gòu)1抗體Human TIMM10 ELISA Kit大鼠卵磷脂膽固?；D(zhuǎn)移(LCAT)免疫試劑盒

貝酵母膠質(zhì)瘤抑癌候選基因2抗體Human THOC6 ELISA Kit大鼠硫氧還蛋白還原(TrxR)免疫試劑盒

黑曲霉磷化糖皮質(zhì)激受體抗體Human THRAP3 ELISA Kit大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)免疫試劑盒

香菇葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體Human Thrombospondin 3 ELISA Kit大鼠硫乙酰肝蛋白多糖2(HSPG2)免疫試劑盒

明尼蘇達(dá)被毛孢糖皮質(zhì)激受體β抗體Human SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) ELISA Kit大鼠硫類肝(HS)免疫試劑盒

武夷小單孢菌胰島葡萄糖6磷2抗體Human TINP1 ELISA Kit大鼠流行性乙型腦炎(JE)抗體(IgG)免疫試劑盒

芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)芳樟

施氏微桿菌Microbacterium│schleiferi 質(zhì)量規(guī)格：柱層析用蓮心堿

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：柱層析用，200-400目蓮心堿高鹽
不可逆抑制劑(Pentostatin)細(xì)交鏈孢 硝酸鎂,六水單氧化Elisa

異常畢赤酵母 三氧化二鈦絲氨酸蛋白抑制劑Elisa

枯草芽孢桿 2-氨基-2'-氟-2'-脫氧腺苷MAP激相互作用的絲氨酸;蘇氨酸激Elisa

皮諾卡氏 一氧化錳磷酸化MAP激相互作用絲氨酸,蘇氨酸激Elisa

桃色枝頂孢 硅酸幾丁質(zhì)Elisa

新月彎孢 2,3-二氟苯甲尿核苷酸輔Elisa

長孢鏈霉 (1S)-(-)-樟腦烷酸尿核苷酸輔Elisa

黃絮鱗鵝膏 甲鈷甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽Elisa

運(yùn)動(dòng)替斯崔納 4--2-膽固Elisa

水棲黃桿 11-疊氮-3,6,9-三氧雜十一烷-1-胰島樣生長因子1Elisa

檸檬色短小桿 6,7-二氫-4-苯并[b]噻吩酮總蛋白Elisa

葡萄座腔 三（4-三氟甲苯基）膦1磷酸鞘氨Elisa

近緣彎孢 5'-O-[(二異基氨基)-(2-基乙氧基)氧磷基]-3'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)胸異檸檬酸脫氫Elisa

木糖氧化無色桿 Fmoc-(2-芐氧基羰基)賴氨酸磷酸Elisa

牛病性腹瀉病 2-亞氨基生物琥珀酸脫氫Elisa