CDK8抑制劑(CCT-251921)公司*的產(chǎn)品：FN/RBITC 紅色熒光標(biāo)記纖維連接蛋白抗體IgG鄰苯 97%
FOS B/FITC 熒光標(biāo)記FosB抗體IgG鄰苯 99%
FOSL1/FITC 熒光標(biāo)記兔抗FOSL1抗體IgG鄰苯 Standard for GC
FOSL2/FITC 熒光標(biāo)記兔抗FOSL2抗體IgG鄰苯 99.0%
FOXJ1/HFH-4/FITC 熒光標(biāo)

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：CDK8抑制劑(CCT-251921)

英文名稱：CCT-251921

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

巴氏醋桿菌小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物Anti-OR2T11 Antibody人解整合樣金屬蛋白10(ADAM10)

根瘤菌人白介-5Anti-OR2T11 Antibody人解整合樣金屬蛋白10(ADAM10)

灰黃鏈霉菌蘇州亞種人白介4Anti-OR2T2 Antibody人基質(zhì)金屬蛋白11(MMP11)

平菇大鼠髓系觸發(fā)受體-1Anti-OR2T29 Antibody人基質(zhì)金屬蛋白11(MMP11)

Salmonella enterica subsp. indica小鼠中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白Anti-OR2T35 Antibody人胸苷合成(TS)

大腸埃希菌人白介3Anti-OR2T35 Antibody人胸苷合成(TS)

根瘤菌小鼠幽門螺旋菌IgGAnti-OR2W3 Antibody人胸腺嘧啶核苷磷化(TP)

鰻斯頓氏菌大鼠膠原IAnti-OR2T3 Antibody人胸腺嘧啶核苷磷化(TP)

谷糠乳桿菌大鼠磷化蛋白激CAnti-OR2Z1 Antibody人多聚ADP核糖聚合(PARP)

貝萊斯芽孢桿菌小鼠多巴D1受體Anti-OR4A15 Antibody人多聚ADP核糖聚合(PARP)

淡黃籃狀菌人白介2可溶性受體β鏈Anti-OR3A2 Antibody人葡萄糖激(GCK)

間型莢胞腔菌大鼠磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激Anti-OR3A3 Antibody人葡萄糖激(GCK)

黃桿菌人白介2可溶性受體α鏈Anti-OR2Y1 Antibody人單氧化(MAO)

熒光假單胞菌小鼠腎上腺能a1A受體Anti-OR4A16 Antibody人單氧化(MAO)

釀酒酵母人白介2Anti-OR4A4P Antibody人胞漿型磷脂A2(cPLA2)

鏈格孢大鼠組織蛋白KAnti-OR4C13 Antibody人胞漿型磷脂A2(cPLA2)

環(huán)指蛋白138抗體禾頂囊殼小麥變種人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

RH血型C糖蛋白抗體壞損尾孢EMEM(MEM+NEAA)*培養(yǎng)基：

細(xì)胞周期依賴性激抑制相關(guān)蛋白抗體中田盾殼霉人急性B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

RNA結(jié)合蛋白38抗體圍小叢殼人結(jié)腸癌耐紫衫藥細(xì)胞
CDK8抑制劑(CCT-251921)嗜熱鏈球 異野漆樹苷

三葉草根瘤 Ethyl 2,4,6-trihydroxybenzoate

氣生鞘氨單胞 麥角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮

魯氏不動(dòng)桿 異野漆樹苷

白孢鏈霉易毀霉亞種 Ethyl 2,4,6-trihydroxybenzoate

易變鏈霉 麥角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 鐵屎米酮

多殺性巴氏桿 5-Heptadecylresorcinol

球孢白僵 吐葉

兔出血癥病 鴨嘴花堿酮

Viridibacillus arenosi 豆甾-4-烯-3,6-二酮

大腸埃希 Sitoindoside I

球孢鏈霉 蛇紋石

赤曲霉 櫻桃甙；洋李甙

阿魏側(cè)耳 脫水長(zhǎng)葉九里香內(nèi)酯 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)