商品介紹:
NFAT Inhibitor是一種選擇性的NFAT抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:249537-73-3 別名:VIVIT peptide;MAGPHPVIVITGPHEE 純度:98.41% 分子量:1685.94 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
環(huán)蓋鵝膏菌磷化蓬亂蛋白2抗體Human RSAD1 (Radical S-adenosyl methionine domain-containing protein 1, mitochondrial) ELISA KIT人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)免疫試劑盒
高地芽孢桿菌Wnt通路抑制因子2抗體Human ANKRD19P (Putative ankyrin repeat domain-containing protein 19) ELISA KIT人α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒
德氏乳桿菌保加利亞亞種磷化B淋巴銜接分子DAPP1抗體Human PHTF1 (Putative homeodomain transcription factor 1) ELISA KIT人α1抗胰糜蛋白(AACT)免疫試劑盒
香蕉磷化Fas相關死亡結構域蛋白抗體Human IGDCC3 (Immunoglobulin superfamily DCC subclass member 3) ELISA KIT人α1抗(α1-AT)免疫試劑盒
米曲霉冷休克蛋白DBPA抗體Human ADARB2-AS1 (Putative uncharacterized protein ADARB2-AS1) ELISA KIT人α1防御(DEFA1)免疫試劑盒
根桿菌屬脫帽1A抗體Human PC (Pyruvate carboxylase, mitochondrial) ELISA KIT人α1β糖蛋白(α1β-GP)免疫試劑盒
平滑假絲酵母清道夫脫帽/熱休克蛋白1抗體Human QRFPR (Pyroglutamylated RFamide peptide receptor) ELISA KIT人α/β干擾受體(IFN-α/βR)免疫試劑盒
淡色生赤殼干擾調節(jié)因子4結合蛋白抗體Human PYCARD (Apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD) ELISA KIT人Z-DNA結合蛋白1(ZBP1)免疫試劑盒
金色橫裂鏈霉菌DNA交聯(lián)修復蛋白1C抗體Human ECM29 (Proteasome-associated protein ECM29 homolog) ELISA KIT人Wnt-3a蛋白(WNT3A)免疫試劑盒
傳染性支氣管炎病磷化凋亡相關蛋白激2抗體Human PROCA1 (Protein PROCA1) ELISA KIT人v-rel禽網(wǎng)狀內皮過多癥病癌基因同源物B(RelB)免疫試劑盒
稻生黃單胞菌凋亡相關蛋白激樣蛋白1抗體Human BORA (Protein aurora borealis) ELISA KIT人vav3鳥嘌呤核苷交換因子(VAV3)免疫試劑盒
酒色青霉磷化凋亡相關蛋白激1抗體Human PPP1R13B (Apoptosis-stimulating of p53 protein 1) ELISA KIT人U型肌激,線粒體(CKMT1A)免疫試劑盒
紫桿菌*牙本質基質蛋白1抗體Human POMK (Protein O-mannose kinase) ELISA KIT人UV切除修復蛋白RAD23 同源物A(RAD23A)免疫試劑盒
米曲霉雙特異性酪磷化調節(jié)激DYRK2抗體Human PKN1 (Serine/threonine-protein kinase N1) ELISA KIT人U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)免疫試劑盒
Bacillus tequilensis鋅指結構蛋白20抗體Human PPP2R4(Serine/threonine-protein phosphatase 2A activator) ELISA Kit人T急性淋巴母白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)免疫試劑盒
繩狀籃狀菌C型凝集受體CLEC13A抗體Human METRN(Meteorin) ELISA Kit人T活化連接蛋白(LAT)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規(guī)格:1000μg/ml一枝蒿
立枯絲核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 質量規(guī)格:1000μg/ml,介質:2.0mol/L HCl吳茱萸內酯
灰綠鏈霉菌Streptomyces│griseoviridis 質量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:2.0Mol/L HCl土大黃苷
NFAT抑制劑(NFAT Inhibitor)磺地平(標準品)英文名稱: Enrofloxacin CHIC2蛋白抗體包裝25g
(標準品)英文名稱: Enrofloxacin HCL磷化周期檢測點激1抗體包裝5g
,安息香(標準品)英文名稱: Enrofloxacin HCL磷化周期檢測點激2抗體包裝100ml
(標準品)英文名稱: Zolmitriptan磷化周期檢測點激2抗體包裝25ml
硝唑(標準品)英文名稱: Thymosin alpha 1 Acetate磷化周期檢測點激2抗體包裝50MG
硝唑(標準品)英文名稱: Tegafur磷化周期檢測點激2抗體包裝25g
利扎曲普坦(標準品)英文名稱: Tegafur遺傳性脈絡膜缺乏癥相關蛋白抗體包裝5g
鈉(標準品)英文名稱: Acipimox遺傳性脈絡膜缺乏癥相關蛋白樣抗體包裝50MG
乙酯(標準品)英文名稱: Acipimox腺癌標志物CHMP2A抗體包裝1g
噻啶(標準品)英文名稱: Adapalene染色質修飾蛋白CHMP6抗體包裝5g
妥英(標準品)英文名稱: Adapalene染色質修飾蛋白CHMP5抗體包裝100g
妥英鈉(標準品)英文名稱: Adefovir間隙連接蛋白31.1抗體包裝25g
溴馬(標準品)英文名稱: Adefovir緊密連接蛋白10抗體包裝100g
扎貝特(標準品)英文名稱: alfacalcidol緊密連接蛋白23抗體包裝1g
扎銨(標準品)英文名稱: PS 48緊密連接蛋白22抗體包裝25g