公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:微管聚合和HIF-1抑制劑
英文名稱:2-Methoxyestradiol
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
2-Methoxyestradiol是一種microtubule和HIF-1抑制劑,在秋水仙堿位點(diǎn)或附近結(jié)合到tubulin,且抑制微管聚合,通過干擾正常微管功能而發(fā)揮作用。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):362-07-2 別名:2-ME2;NSC-659853 純度:99.54% 分子量:302.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
比阿婁維扎青霉 磷化淋巴特異性蛋白酪激抗體Human PKD2L1 ELISA Kit因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)
枯草芽孢桿菌膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體Human PIWIL2 ELISA Kit纖維連接蛋白(cFn)
黑腐皮殼磷化膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體Human PIP5K1A ELISA Kit外基質(zhì)磷糖蛋白(MEPE)
解脂假絲酵母磷化膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體Human PJA1 ELISA Kit色P450c21B/21-羥化(CYP21B)
洛格酵母腦瘤相關(guān)基因抗體Human PIP5K1B ELISA Kit色P450c21A/21-羥化(CYP21A)
香菇大腦邊緣系統(tǒng)相關(guān)膜蛋白抗體Human PIP5K3 ELISA Kit色P450(CYP450)
相思根瘤菌神經(jīng)突觸粘附樣分子1抗體Human PIP5KL1 ELISA Kit色c氧化Ⅵα亞基多肽1(COX6A1)
大腸埃希氏桿菌富含亮重復(fù)序列/Ⅲ型纖維連接蛋白4抗體Human PITPNA ELISA Kit色C氧化(COX)
球孢白僵菌層粘蛋白α4抗體(Lamininα4)Human PIR ELISA Kit色C-1(CYC1)
釀酒酵母層粘蛋白α4抗體(Lamininα4)Human PITPNB ELISA Kit色C(Cyt-C)
鏈霉菌 (灰褐類群)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1抗體Human PIGT ELISA Kit色b561(cytb561)
天藍(lán)色鏈霉菌淋巴趨化因子抗體Human PIGS ELISA Kit絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)
產(chǎn)短桿菌低密度脂蛋白受體5樣蛋白抗體Human PIGZ ELISA Kit絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)
根瘤菌富含亮重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白3抗體Human PIH1D1 ELISA Kit膜表面免疫球蛋白(SmIg)
單色革蓋菌扁豆凝集Human PIK3C2G ELISA Kit膜DNA抗體(cmDNA)
卷枝毛霉磷化富亮重復(fù)激2抗體Human IL20RA(Interleukin-20 receptor subunit alpha) ELISA Kit角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)貝母乙
暫無Prolixibacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)貝母
蛹假交替單胞菌Pseudoalteromonas│undina 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)(T)2,3,5,4-四羥基二乙烯葡萄糖苷
微管聚合和HIF-1抑制劑 4-甲基聯(lián)苯環(huán)氧合Elisa
黑曲霉 2-異基苯心水病抗原Elisa
白僵 雙(2-嗎啉二乙基)(DMDEE)狀瘤病Elisa
擬柱形德克斯酵母 2,5-二氟苯T調(diào)節(jié)因子1Elisa
死海鹽盒 1-溴-2,6-二氟苯直接膽紅Elisa
芽孢桿屬 9-蒽總膽紅Elisa
釀酒酵母 2-氟-5-甲間接膽紅Elisa
黃薄孔 脫氫乙酸 鈉鹽 一水合物膽酸Elisa
德氏乳桿保加利亞亞種 (S)-(+)-2-(苯基)吡咯烷谷草轉(zhuǎn)氨Elisa
魯氏接合酵母 三苯基化錫磷脂Elisa
大腸埃希 三十烷異檸檬酸脫氫Elisa
青霉 二十三烷NADH脫氫復(fù)合物Elisa
青霉屬 三聚硫酸酮酸羧化Elisa
棲異地克雷伯氏 乙基叔丁基神經(jīng)肽YElisa
黑球漆斑 1,4-環(huán)己二酮膽囊收縮Elisa