商品介紹:
GW0742(GW610742)是一種有效的高度選擇性PPARδ激動(dòng)劑,作用于PPARδ,-α,和-γ受體,EC50值分別為1nM,1.1μM and2μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):317318-84-6 別名:GW610742 純度:99.63% 分子量:471.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:高度PPARδ激動(dòng)劑(GW0742)
英文名稱:GW0742
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
艱難鏈霉菌蛋白激Aγ抗體Anti-BGLAP Antibodyβ淀粉樣多肽42(ABeta 42)
紅球菌蛋白激受體相關(guān)1β抗體Anti-BEST1 Antibodyβ淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)
大腸埃希菌B淋巴誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體Anti-BEST1 Antibodyβ淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌磷化酪磷α抗體Anti-BGLAP Antibodyβ淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)
尾孢屬蛋白激A調(diào)節(jié)亞基a1抗體Anti-BGLAP Antibodyβ淀粉樣蛋白(Aβ)
釀酒酵母磷化酪磷α抗體Anti-BGLAP Antibody(PB0074)β-促脂(β-LPH)
小鏈霉菌(小諾卡氏菌)PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK5A蛋白抗體Anti-BID Antibodyβ半乳糖苷(β-GAL)
總狀橫梗霉磷脂磷水解1抗體Anti-BID Antibodyβ半乳糖苷(βGAL)
蘇云金芽胞桿菌抑癌基因p16/p14/P19抗體Anti-BID Antibodyβ基己糖苷A(β-Hex A)
黑木耳蛋白酪磷H1抗體Anti-BID Antibodyβ4整合(ITG β4/CD104)
阿布拉鏈霉菌除瘟變種磷化磷脂酰肌激催化亞單位D抗體Anti-BID Antibodyβ2轉(zhuǎn)鐵蛋白(β2TF)
錳氧化褐黃海水菌磷化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體Anti-BIRC3 Antibodyβ2整合(ITG β2/CD11+CD18)
單孢哈薩克斯坦酵母穿孔抗體Anti-BIK Antibody(PB0802)β2微球蛋白(β2-MG)
芽孢桿菌PALM3抗體Anti-BID Antibody(PB0015)β2微球蛋白(MGβ2)
無(wú)花果奇異球菌芳香酯1(對(duì)氧磷)抗體Anti-BIRC2 Antibodyβ2微球蛋白(BMG/β2-MG)
蕓薹鏈格孢(可訂)磷吡哆氧化抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)
海泥鼠尾菌Muricauda│lutimaris 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
苛求芽孢桿菌Bacillus│fasridiosus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
耶羅威亞解脂酵母Yarrowia│lipolytica 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
高度PPARδ激動(dòng)劑(GW0742)大腸埃希 2-乙?;烈种频鞍譋lisa
殼蕉孢 馬鈴薯-蔗糖培養(yǎng)基磷酸化BElisa
雜色尾孢 無(wú)機(jī)鹽瓊脂培養(yǎng)基纖溶抑制因子;凝血激活的纖溶抑制物Elisa
類動(dòng)膠杜搟氏屬 卵黃雙抗培養(yǎng)基(EPV)白介10βElisa
休哈塔假絲酵母休哈塔亞種 茴香二甲基縮前列腺E合2Elisa
大豆慢生根瘤 匹克氏肉湯基礎(chǔ)B6酮前列腺Elisa
解桿 亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液(BGB)血栓Elisa
柑橘炭疽盤孢 基代磺酸早孕因子蛋白Elisa
大腸埃希 沙門氏成套生化鑒定管(SMGB)不飽和脂肪酸Elisa
喜鹽芽孢桿 霍亂弧成套生化鑒定管飽和脂肪酸Elisa
樟疫霉 沙門氏成套生化鑒定管(S)出血熱抗體Elisa
熱帶假絲酵母 蠟樣芽孢桿成套生化鑒定管2,3-二磷酸甘油酸Elisa
Microbacterium pumilum 單增李斯特氏成套生化鑒定管紅膜蛋白Elisa
斯氏假單胞 副溶血性弧成套生化鑒定管(SN/T0173-2010)Ⅰ型前膠原N端前肽Elisa
淡紫犁頭霉 O157成套生化鑒定管抗酸性磷酸Elisa