公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):GSK-3α抑制劑(SB 415286)
英文名稱(chēng):SB 415286
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
SB415286是一種有效的GSK-3α抑制劑,IC50值為77.5nM,Ki值為30.75nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):264218-23-7 純度:99.88% 分子式:C??H??ClN?O? 分子量:359.72 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
暗蓋淡鵝膏菌GA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子α/GABP-α抗體Human TMEM16A/DOG1 ELISA Kit大鼠皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
巨大芽胞桿菌GA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子β/GABP-β1/GABP-β2抗體Human TMEM175 ELISA Kit大鼠牛血清白蛋白(BSA)抗體(IgG)免疫試劑盒
耐久腸球菌谷脫羧65+谷脫羧67抗體Human TMEM173(Transmembrane protein 173) ELISA Kit大鼠XIV(FXIV/protein C)免疫試劑盒
塔賓曲霉谷脫羧樣蛋白1抗體Human TMEM176A ELISA Kit大鼠IX(FIX)免疫試劑盒
分枝節(jié)桿菌葡萄糖-6-磷3/G6Pase-β抗體Human TMEM102 ELISA Kit大鼠Ⅻ(FⅫ)免疫試劑盒
淺天青鏈霉菌α葡萄糖苷/溶體α-葡糖苷抗體Human TMEM176B ELISA Kit大鼠ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫試劑盒
Sporosarcina生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白3抗體Human TMEM108 ELISA Kit大鼠Ⅹ(FⅩ)免疫試劑盒
盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白4抗體Human TMEM161A ELISA Kit大鼠Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒
淺白隱球酵母G基丁受體pi/GABAA Rπ抗體Human TMEM168 ELISA Kit大鼠凝血原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌磷化G基丁B型受體2抗體Human TMEM165 ELISA Kit大鼠凝血受體(TR)免疫試劑盒
棉阿舒囊霉G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白α11/Gα 11 抗體Human TMEM16A/DOG1 ELISA Kit大鼠凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒
Lactobacillus brevisG3BP2蛋白抗體Human TLE1 ELISA Kit大鼠凝血抗凝血Ⅲ復(fù)合物(TAT-III)免疫試劑盒
檸檬色短小桿菌γ基丁運(yùn)載蛋白2抗體Human TMEM173(Transmembrane protein 173) ELISA Kit大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)免疫試劑盒
游動(dòng)放線(xiàn)菌*β1-6 N-乙?;咸烟寝D(zhuǎn)移3抗體Human ITIH1(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1) ELISA Kit大鼠凝聚(CLU)免疫試劑盒
格氏嗜鹽堿桿菌β1-6 N-乙?;咸烟寝D(zhuǎn)移7抗體Human TM7SF3 ELISA Kit大鼠檸檬合(CS)免疫試劑盒
大腸埃希菌γ-微管蛋白GCP4抗體Human TM9SF4 ELISA Kit大鼠尿液三葉因子3(TFF-3)免疫試劑盒
棲珊瑚假交替單胞菌Pseudoalteromonas│paragorgicola 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品基蓮心堿
貝倫格葡萄座腔菌Botryosphaeria│berengeriana De Not. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品基酞
灰葡萄孢Botrytis│cinerea 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品桑皮苷C
GSK-3α抑制劑(SB 415286)楤木皂苷A英文名稱(chēng): Amikacin成纖維生長(zhǎng)因子受體2抗體包裝1g
粗葉懸鉤子甙英文名稱(chēng): Aminophyllin hydrate成纖維生長(zhǎng)因子受體4抗體包裝5g
醋辛酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ammonium bismuth citrate, hydrate凝血原(纖維介)抗體包裝1g
大波斯菊苷,芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)...英文名稱(chēng): Ammonium bromide衰老關(guān)鍵蛋白抗體包裝25ml
大車(chē)前苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ammonium iodide凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體包裝5ml
大豆苷,黃豆苷 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體(短型)包裝25ml
大豆,黃豆苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ammonium molybdate, tetrahydrate纖維連接蛋白抗體包裝5ml
大風(fēng)子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ammonium phosphomolybdate , hydrateFosB蛋白抗體包裝250mg
大腹皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ammonium sodium phosphateFRA2/FOSL2抗體包裝1g
大果木姜子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ammonium succinate叉頭蛋白P3抗體包裝5g
大紅袍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ammonium thiosulfate成纖維生長(zhǎng)因子8抗體包裝50mg
大黃(掌葉大黃)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Amprolium hydrochloride肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體包裝25g
大黃(藥用大黃)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Antimony (III) oxide線(xiàn)粒體裂變1蛋白抗體包裝5g
大黃酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Azomethine-H monosodium salt叉頭蛋白P1抗體包裝25g
大黃酚-8-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Azure C鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克抗體包裝5g