詳細(xì)介紹
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100T | 1~3天 |
商品介紹:
PI染色細(xì)胞凋亡檢測試劑盒是采用PI染細(xì)胞核的方法檢測細(xì)胞的狀態(tài)。Propidium Iodide 是一種DNA 結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和630nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無膜通透性,不能透過活細(xì)胞膜,只能染死細(xì)胞。因此,在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞不能著色,早期凋亡細(xì)胞呈微弱紅光,晚期凋亡細(xì)胞紅光加強,壞死細(xì)胞呈強紅色熒光。PI-DNA 復(fù)合物的激發(fā)波長是535nm。 儲存條件:4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。 有效期:一年。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
維地平丁酯/丁維地平英文名稱: Gemcitabine HCl周期蛋白依賴性激抑制蛋白3抗體包裝25g
洛伐他汀英文名稱: Gemifioxacin Mesylate角蛋白42包裝5g
洛美他派英文名稱: Gemifioxacin MesylateCD105抗體包裝1g
馬來地平英文名稱: Sodium cholate半胱蛋白蛋白-7抗體包裝5g
馬來桂哌齊特英文名稱: Glucagon AcetateCD8/CD8-β抗體包裝25g
馬來噻嗎洛爾英文名稱: Gonadorelin Acetate周期蛋白依賴性激CABLES2抗體包裝5g
嗎多明英文名稱: Granisetron HCl兔抗雞IgY抗體包裝1g
美托拉宗英文名稱: Granisetron HCl20號染色體開放閱讀框128抗體包裝25g
莫索尼定英文名稱: Hydrochlorothiazide色P450ⅡE1抗體包裝5g
那屈肝鈣英文名稱: HydrochlorothiazideB-淋巴趨化因子抗體包裝1g
奈比洛爾鹽鹽;奈必洛爾英文名稱: Hydrocortisone Acetate分裂周期蛋白23抗體包裝25g
萘哌地爾英文名稱: Hydrocortisone Acetate結(jié)腸和肝腫瘤高表達(dá)蛋白抗體包裝5g
尼可地爾英文名稱: IdarubicinHCl周期蛋白依賴性激調(diào)節(jié)亞基1抗體包裝25g
尼莫地平英文名稱: Imatinib Mesylate間粘附分子-1抗體包裝5g
尼群地平英文名稱: Imatinib Mesylate間粘附分子1抗體包裝25g
: ATCC39140資源名稱: 檸檬泛菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%氧化型試劑盒原花青;Procyanidin
豪氏變形菌Proteus│hauseri 質(zhì)量規(guī)格:含量測定氧化高密度脂蛋白試劑盒原兒茶;Protocatechuald
蜜環(huán)菌Armillaria│mellea (Vahl) P. Kumm. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR氧化低密度脂蛋白抗體試劑盒原兒茶;3,4-Dihydroxybe
Propidium Iodide染色試劑盒木糖葡糖酸醋桿 R-3-甲基嗎啉鹽酸鹽超氧化物歧化2Elisa
植物乳桿 春雷霉鹽酸鹽硫氧還蛋白Elisa
枯草芽孢桿 苯并[g,h,i]芘凝血因子XIIIElisa
黃曲霉 沙丁三肽基肽IElisa
羅伊氏乳桿 N-叔丁基-2-苯并噻唑次磺酰包蟲病IgG抗體Elisa
銅綠假單胞 羥哌熱休克蛋白90β1Elisa
釀酒酵母 十一酸甲酯脂質(zhì)運載蛋白-2Elisa
白姬松茸 壬酸甲酯甲型肝炎病抗體Elisa
橙鱗傘 吡咯烷-3-甲酸鹽酸鹽鐮狀瘧原蟲IgG抗體Elisa
釀酒酵母 Gamma-Linolenic Acid Methyl Ester 99%鐮狀瘧原蟲IgM抗體Elisa
蟋蟀草平臍蠕孢 噁喹酸抗凝血因子3Elisa
細(xì)鏈格孢 4-(1-苯基-1H-苯并咪唑-2-基)苯酸趨化因子C-C-基元配體2Elisa
秦氏蜜環(huán) 磺甲二唑趨化因子C-C-基元配體4Elisa
產(chǎn)紫青霉 蓖麻油酸甲酯腎Elisa
香菇 克丹抗原215Elisa