公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PI3K p110β抑制劑(TGX-221)
英文名稱:TGX-221
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
TGX-221是一種高效的、選擇性的、細(xì)胞膜滲透的PI3K p110β抑制劑,常用于癌癥治療。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):663619-89-4 純度:99.78% 分子量:364.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
*銅綠假單孢菌堿性磷(AP)標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VCP Antibody(PB0477)蛋白激R(PKR)
鐮刀菌屬生物標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VDAC3 Antibody蛋白激N2(PKN2)
亮白曲霉Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VDR Antibody(PB0479)蛋白激N1(PKN1)
榛子枝枯病Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VDR Antibody蛋白激D2(PKD2)
植物乳桿菌Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VCAM1 Antibody蛋白激D1(PRKD1)
釀酒酵母PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFA Antibody蛋白激Cι(PKCι)
平臍蠕孢菌PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGF-C Antibody蛋白激Cθ(PKCθ)
根霉屬的菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFA Antibody蛋白激Cη(PKCη)
嗜根寡養(yǎng)單胞菌APC標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFA Antibody蛋白激Cζ(PKCζ)
山崎鏈霉菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFA Antibody蛋白激Cε(PKCε)
枯草芽孢桿菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFB Antibody蛋白激Cδ(PKCδ)
畜肉和水產(chǎn)品鮮度及木耳檢測(cè)設(shè)備PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFA Antibody(PB0084)蛋白激Cγ(PKCγ)
pUG6PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-VEGFB Antibody蛋白激Cβ1(PKCβ1)
嗜硝假絲酵母生物標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-VIL1 Antibody蛋白激Cα相互作用蛋白1(PICK1)
冬菇辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-VEGFB Antibody蛋白激Bγ(PKBγ)
盤(pán)孢屬Cy5標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-VEGFB Antibody蛋白激Bβ(PKBβ)
胎盤(pán)特異基因8蛋白抗體乳乳球菌乳亞種小鼠卵巢組織提取物
早幼粒細(xì)胞白血病鋅指蛋白抗體腸膜明串珠葡萄聚糖亞種小鼠子宮組織提取物
蛋白調(diào)解因子10抗體青枯假單胞菌小鼠子宮頸組織提取物
Rho相關(guān)結(jié)構(gòu)域BTB蛋白質(zhì)1抗體食神鞘桿菌小鼠輸尿管組織提取物
PI3K p110β抑制劑(TGX-221)輪蟲(chóng)弧 曲札茋苷
哈茨木霉 車葉草苷酸
肺炎克雷伯氏 冬青A,
發(fā)白色紅曲霉 毛冬青皂苷甲
木糖葡萄球 弗羅利辛
越南芽孢桿 石當(dāng)歸
熱栗色鏈霉 表蘇木
曲霉 5,7-二羥基-4-甲基
短柄帚霉 6-羥基-7-甲氧基-4-苯基;黃檀
巨大芽胞桿 4-苯基瑞香7-甲基
韓國(guó)假單胞 7,8-二羥基-4-苯基
薄層屬 4-甲基瑞香7-甲基
釀酒酵母 7,8-二羥基-4-甲基
植物乳桿 6,7-二羥基-4-(三氟甲基)
釀酒酵母 6,7-二羥基-4苯基