詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
河弧菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) | 50T | GOY-M6465 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、腦膜炎敗血金黃桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、腦膜炎敗血金黃桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
BLAME/SLAMF8 BLAME抗體 規(guī)格: 0.1ml*
ROS/c ros 活性氧簇ROS抗體 規(guī)格: 0.1ml*
phospho-IRF3(Ser386) 磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3抗體 規(guī)格: 0.1ml*
IASPP 瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體 規(guī)格: 0.1ml*
STK31 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶31抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Collagen II/Chondrocalcin Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體 規(guī)格: 0.1ml*
SLC2A4RG/GLUT4 enhancer factor 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體 規(guī)格: 0.2ml*
AGPB/Alpha 1 acid glycoprotein 2 α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2) 規(guī)格: 0.2ml*
Rabbit Anti-rat IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml*
FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X 母細(xì)胞瘤基因X染色體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Cyclin T2 周期素T2抗體 規(guī)格: 0.2ml*
SKALP/Elafin 彈性蛋白酶抑制劑抗體 規(guī)格: 0.2ml*
ADORA2B 苷A2b受體抗體(神經(jīng)生因子1受體) 規(guī)格: 0.2ml*
ASIC1/BNaC2 酸敏感離子通道1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
HEBP2 Heme結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml*
河弧菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)L-Homoserine L-高絲氨酸1g瓶
2×Taqman PCR MasterMix200T支
革蘭氏陽性菌質(zhì)粒小量提取試劑盒50T盒
考馬斯亮藍(lán)染色套裝100ml+500ml瓶
羊抗人IgA-HRP0.1ml支
魚脾臟淋巴細(xì)胞分離液試劑盒200ml/KIT盒
7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin 7-乙基-10-羥基喜樹堿119577-28-520mg
Prim-O-glucosylcimifugin 升麻素苷80681-45-420mg
10-Hydroxycamptothecin 10-羥基喜樹堿19685-09-720mg
Crotonoside 巴豆苷1818-71-920mg
Xyloteaose 木四糖22416-58-610mg
Dopamine hydrochloride 鹽酸多巴胺62-31-720mg
DL-Methionine DL-蛋氨酸-甲硫氨酸59-51-8200mg
尼龍膜(0.45um)15cm×20cm15cm×20cm張
p-NPP 對硝基苯磷酸二鈉鹽1g瓶
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。