以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
SCD抑制劑(MK-8245) | MK-8245 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
MK-8245是肝靶向的硬脂酰-CoA去飽和酶(SCD)抑制劑,對(duì)人SCD1和鼠SCD1的IC50分別為1nM和3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1030612-90-8 純度:99.33% 分子式:C??H??BrFN?O? 分子量:467.25 儲(chǔ)存條件:-20℃避光,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
金黃色葡萄球菌瘦受體抗體Human PIK3C2B ELISA Kit角蛋白20(CK-20)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌項(xiàng)韌帶彈性蛋白抗體Human PIK3IP1 ELISA Kit角蛋白20(CK20)ELISA Kit
粘鞭霉氧化低密度脂蛋白抗體Human IL20RA(Interleukin-20 receptor subunit alpha) ELISA Kit角蛋白19(CK-19)ELISA Kit
香菇轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β結(jié)合蛋白4抗體Human PIK3C2B ELISA Kit角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA Kit
香菇G蛋白偶聯(lián)受體69BHuman PIK3IP1 ELISA Kit角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA Kit
草青霉李斯特菌菌體蛋白抗體Human PIK3C2G ELISA Kit角蛋白18(CK-18)ELISA Kit
假單胞菌屬Rho的鳥嘌呤核苷交換因子12抗體Human PILRA ELISA Kit角蛋白17(CK17)ELISA Kit
果生鏈核盤菌白血病相關(guān)蛋白5抗體Human PIGB ELISA Kit角蛋白13(CK-13)ELISA Kit
三棱孢小囊菌富含亮重復(fù)蛋白62抗體Human PIM2(Serine/threonine-protein kinase pim-2) ELISA Kit間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA Kit
米氏假單胞菌淋巴磷蛋白磷相關(guān)蛋白抗體Human PI3K p55(gamma) ELISA Kit間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA Kit
解淀粉周培瑾氏菌含亮神經(jīng)膠質(zhì)瘤失活蛋白4抗體Human KLB(Beta-klotho) ELISA Kit間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA Kit
皺曲毛殼淋巴性白血病相關(guān)序列1抗體Human PIF1 ELISA Kit間粘附分子1(ICAM-1)ELISA Kit
鼠乳桿菌L-瓜抗體Human PICK1 ELISA Kit性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA Kit
釀酒酵母半胱蛋白抗體Human PIGK ELISA Kit相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA Kit
釀酒酵母乳脫氫D抗體Human PIG3 ELISA Kit(CTX)ELISA Kit
福氏志賀氏菌蛋白激LYK5抗體Human PIGA ELISA Kit凋亡抑制因子(IAP)ELISA Kit
傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(N)松脂二葡萄糖苷
彎孢單頂孢Monacrosporium│gampsosporum 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)吳茱萸次堿
小單孢菌Micropolyspora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)吳茱萸堿
SCD抑制劑(MK-8245)CKIP-1 酪蛋白激2相互作用蛋白1抗體叔丁 CP
CKMT2 肌激2抗體三(4-) 97%
Clostridium perfringens type D D型產(chǎn)氣莢膜梭菌抗體烯酰, 96%,含~0.05% 噻吩穩(wěn)定劑
CITED1/ABCC1 結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體酰 AR,98.5%
CLCA4 鈣激活離子通道4抗體正丁酰 98%
CLEC1/CLEC1A C型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體代異烷 CP,97%
CLEC2/CLEC1B C型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體代異烷 GR,99%
C-Mer/MERTK c-mer原癌因酪氨激抗體酰 98%