DNA連接酶抑制劑(L67)公司*的產(chǎn)品：factor VIII/FITC 熒光標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原抗體IgG腺苷-5′-三二鈉鹽，三水 98%
factor X III /FITC 熒光標(biāo)記ⅩⅢ抗體IgG三脫氧腺苷鈉鹽 98%
FADD/FITC 熒光標(biāo)記Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體IgG三脫氧腺苷鈉鹽溶液 dATP,100 mM 溶液, pH 7.0
FADD/FITC 熒光標(biāo)記

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：DNA連接酶抑制劑(L67)

英文名稱(chēng)：L67

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

露濕漆斑菌小鼠肝脂Anti-NXPH3 Antibody人骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)

子午線(xiàn)假單胞菌大鼠尿激Anti-NXPH4 Antibody人骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)

葡萄牙假絲酵母人血管內(nèi)皮粘附分子1Anti-OAZ1 Antibody人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)

大麗花輪枝孢（棉花黃萎病菌）小鼠乙型肝炎核心抗體Anti-OAT Antibody人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)

臭曲霉小鼠乙型肝炎e抗體Anti-OCRL Antibody人1,25二羥基維生D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)

信州靈芝大鼠ⅫAnti-OGN Antibody人1,25二羥基維生D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)

冷溫木克酵母人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體Anti-ODF2 Antibody人組蛋白H2b(histon-H2b)

枯草芽孢桿菌人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4Anti-OLFML2B Antibody人組蛋白H2b(histon-H2b)

弗雷德里克斯堡假單胞菌小鼠乙型肝炎e抗原Anti-OLFML2A Antibody人骨保護(hù)(OPG)

草色鏈霉菌大鼠ⅩⅢAnti-OLFML2B Antibody人骨保護(hù)(OPG)

灰葡萄孢（灰霉病菌）大鼠ⅢAnti-OPN3 Antibody人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)

斑玉蕈人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3Anti-OPN4 Antibody人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)

印度毛殼小鼠乙型肝炎表面抗體Anti-OPN5 Antibody人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)

釀酒酵母小鼠二氧化Anti-OR10A4 Antibody人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)

伯頓生絲畢赤酵母大鼠載脂蛋白HAnti-OPRD1 Antibody人骨成型蛋白4(BMP-4)

香菇人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1Anti-OR10A5 Antibody人骨成型蛋白4(BMP-4)

RAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)AB17抗體白色雞腿菇人骨髓細(xì)胞

G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB38抗體雞腿菇CC77人慢性髓原白血病細(xì)胞

G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB10抗體瑞10#(雞腿菇)人畸胎瘤細(xì)胞

G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB11a抗體雞腿菇人鼻咽癌細(xì)胞
DNA連接酶抑制劑(L67)鏈球(不定種) 偏釩酸鈉

戊糖乳桿 L(-)鈉

枯草芽孢桿 2,2’-聯(lián)喹啉-4,4’-二羧酸鈉

中慢生華癸根瘤 酮酸鈉

紫丁香蘑 植酸鈉鹽水合物

大腸桿 ER2738 植酸鈉

釀酒酵母 丁酸鈉

樹(shù)狀微桿 2,6-二靛鈉鹽

平臍蠕孢 2,6-二靛

金針菇 牛磺膽酸鈉

球孢白僵 膽酸鈉（豬）

產(chǎn)氨短桿 脫氧膽酸鈉（牛）

貝倫格葡萄座腔 四水磷酸肌酸二鈉鹽

叢鞭毛游動(dòng)放線(xiàn) 無(wú)水磷酸肌酸二鈉鹽

孟氏假單胞 二磷酸四鈉鹽 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)