PI3Kβ抑制劑(GSK2636771)公司正在出售的產(chǎn)品：Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit 人阿拉伯半乳糖蛋白麥角固 95%
Human Beta Lactoglobulin, Beta-Lg ELISA Kit 人β乳球蛋白4--2- 99%
Human Beta catenin, Beta-Cat ELISA Kit 人β連環(huán)蛋

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

意大利酵母血栓A2受體抗體Anti-HNRNPL Antibody晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)

布魯氏菌 生物Ⅴ型Toll樣受體11抗體Anti-HOMER3 Antibody晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGE)

金霉鏈霉菌(生金色鏈霉菌)血小板反應(yīng)蛋白抗體Anti-HOXA10 Antibody烷基甘油單加氧(AGMO)

無端粒相關(guān)蛋白2/端粒逆轉(zhuǎn)錄抗體Anti-HOXA10 Antibody外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)

圓酵母屬血小板反應(yīng)蛋白2/凝血敏感蛋白2抗體Anti-HOXA10 Antibody外周蛋白2(PRPH2)

白色彎曲嗜菌四分子交聯(lián)體17抗體（四旋蛋白）Anti-HOXA11 Antibody外周蛋白(PRPH)

赤霉屬髓系觸發(fā)受體1抗體Anti-HOOK2 Antibody外異蛋白A(EDA)

大腸埃希氏菌緊密連接蛋白2抗體Anti-HOOK3 Antibody外血小板溶1(EPPK1)

枝狀枝孢磷化埃茲蛋白抗體Anti-HOXA3 Antibody外生骨疣樣蛋白1(EXTL1)

節(jié)桿菌單克抗體Anti-HOXA4 Antibody外生骨疣蛋白2(EXT2)

冷海水黃桿菌微管相關(guān)蛋白α6抗體Anti-HOXA5 Antibody外生骨疣蛋白1(EXT1)

淡紫紫霉T淋巴轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子TFEB抗體Anti-HOXA6 Antibody外切體成分9(EXOSC9)

玉米乳桿菌轉(zhuǎn)鐵蛋白單克抗體Anti-HOXA7 Antibody外切體成分8(EXOSC8)

鴨疫里氏桿菌促甲狀腺抗體Anti-HOXB9 Antibody外切體成分7(EXOSC7)

金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）促甲狀腺單克抗體Anti-HP Antibody外切體成分6(EXOSC6)

皺木耳磷化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激1Anti-HOXD11 Antibody外切體成分5(EXOSC5)

神經(jīng)突觸13抗體谷棒桿菌人神經(jīng)元細(xì)胞

多配體聚糖結(jié)合蛋白2抗體宇佐美曲霉變種人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞

胞吐分泌蛋白Sec6抗體布氏乳桿菌人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞

突觸結(jié)合蛋白11抗體乳桿菌屬人腦膜成纖維細(xì)胞
PI3Kβ抑制劑(GSK2636771)糞生毛殼 鈹/Be7α-羥膽固 Elisa

彩色豆馬勃 覆盆子酮賴氨酰吡碇Elisa

貝倫格葡萄座腔梨生?；?/span> 吡哌酸羥賴氨酰吡碇Elisa

枯草芽胞桿枯草亞種 鋇/BaαS1酪蛋白Elisa

豬鏈球 1-乙基-3-甲基咪唑四氟酸鹽[用于熔鹽]αS2酪蛋白Elisa

白地霉 /Bβ酪蛋白Elisa

塔賓曲霉 金/Auκ酪蛋白Elisa

聚生殼 阿昔洛韋輸血傳播病1型抗體Elisa

香菇 砷/As白介33Elisa

多主殼 苯溴馬隆Toll樣受體5Elisa

嗜熱鏈球 鋁/Al硒蛋白PElisa

穗狀平臍蠕孢 銀/Ag抗N蛋白抗體Elisa

杜拉柱隔孢 拉莫三微粒體三酰甘油轉(zhuǎn)移Elisa

腫紅皮孔 鋁、砷、、鋇、鈹、鈣、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、汞、、鎂、錳、鉬、鎳、鉛、銻、硒、錫、鈦、、釩、鋅、豬瘟病E2抗體Elisa

貝氏不動(dòng)桿 硒、碲/Se, Te抑制AElisa