公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Akt廣譜抑制劑(GSK2141795)
英文名稱:GSK2141795
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
GSK2141795是一種有效的,選擇性的Akt廣譜抑制劑,抑制Akt1/Akt2/Akt3的活性,IC50值分別為180/328/38nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1047634-65-0 別名:Uprosertib 純度:99.85% 分子量:429.25 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
金乳牛肝菌豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍耳病病抗體Anti-BAG3 Antibodyγ肽(Pγ)
美澳型核果褐腐病菌凋亡相關(guān)蛋白10抗體Anti-BAG1 Antibodyγ谷酰轉(zhuǎn)移(GGT)
美澳型核果褐腐病菌鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激磷抗體Anti-BAG1 Antibodyγ-谷酰環(huán)化轉(zhuǎn)移(GGCT)
門多薩假單胞菌絲/蘇蛋白激PIM3抗體Anti-BAG5 Antibodyγ谷酰半胱合成(γ-ECS)
蠟樣芽孢桿菌組蛋白精甲基轉(zhuǎn)移5抗體Anti-BAG5 Antibodyγ谷-半胱合成(γ-GCS)
熱帶假絲酵母原鈣粘附蛋白11X抗體Anti-BAG3 Antibodyγ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)
粉紅聚端孢霉原鈣粘附蛋白11Y抗體Anti-BAK(BAK1) Antibodyγ干擾誘導(dǎo)單核因子(MIGF/CXCL9)
暗褐色毛霉原鈣粘附蛋白12/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白2抗體Anti-BAG6 Antibodyγ干擾受體(IFN-γR)
枯草芽孢桿菌原鈣粘附蛋白17抗體Anti-BAP1 Antibodyγ干擾(IFN-γ)
三葉草根瘤菌原鈣粘附蛋白1抗體Anti-BAX Antibodyγ干擾(IFNγ)
杰丁畢赤酵母原鈣粘附蛋白α1抗體Anti-BAK1 Antibodyγ分泌激活蛋白(PION)
深紅沙雷氏菌原鈣粘附蛋白α3抗體Anti-BAMBI Antibodyγ基丁(GABA)
金龜子綠僵菌原鈣粘附蛋白α4抗體Anti-BAX Antibodyβ-轉(zhuǎn)導(dǎo)重復(fù)序列包含蛋白(BTRC)
短乳桿菌原鈣粘附蛋白α5抗體Anti-BAX Antibodyβ抑制蛋白2(ARRB2)
發(fā)酵假絲酵母原鈣粘附蛋白α9抗體Anti-BAX Antibodyβ血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)
側(cè)毛殼原鈣粘附蛋白α7抗體Anti-BAX Antibodyβ血小板球蛋白(β-TG)
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品,還原型
巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質(zhì)量規(guī)格:純度大于98%,BR
干酪乳桿菌假植物亞種Lactobacillus│casei subsp .pseudoplantarum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Akt廣譜抑制劑(GSK2141795)香菇* 固體培養(yǎng)基低氧誘導(dǎo)因子-1βElisa
成晶節(jié)桿 改良GAM瓊脂抑劑水通道蛋白1Elisa
多脂鱗傘 高鹽度腦心浸液肉湯水通道蛋白2Elisa
枯草芽孢桿 膽汁七葉苷瓊脂水通道蛋白3Elisa
蘇云金芽孢桿太平洋亞種 腦心浸液肉湯腎損傷分子1Elisa
柱狀田頭菇(茶樹菇、楊樹菇) 酵母蛋白胨培養(yǎng)基氧化三Elisa
巴貝斯蟲(青海貴南株) 胰蛋白胨大豆瓊脂血管生成1Elisa
耐冷冷桿 類桿-膽汁-七葉苷(BBE)瓊脂血管生成2Elisa
大毛霉 莫匹羅星鋰鹽改良MRS培養(yǎng)基血小板反應(yīng)蛋白;凝血敏感蛋白1Elisa
大腸埃希 甘露瓊脂培養(yǎng)基CD31分子Elisa
尖角凸臍蠕孢 3,5-雙(三氟甲基)苯甲酰基質(zhì)金屬蛋白2Elisa
金黃桿屬 KF鏈球肉湯白介12Elisa
蘋果黑腐皮殼 RODAC培養(yǎng)皿(TSA)活化蛋白CElisa
新疆鹽地桿 莫匹羅星鋰鹽自然殺傷Elisa
麻疹孿生球 四硫磺酸鹽煌綠增液(TTB肉湯)主要急性期蛋白Elisa