產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Masson三色染色液(固綠法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:7×50ml|7×100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 經(jīng)典膠原纖維染色,可區(qū)分膠原纖維和肌纖維。 注意事項(xiàng): 染核后能更容易區(qū)分膠原纖維和肌纖維,本試劑盒采用經(jīng)典的Weigert蘇木素。其結(jié)果為:膠原纖維呈藍(lán)色,胞核呈藍(lán)褐色肌纖維、紅細(xì)胞等呈紅色。 儲存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
表告依春(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HClIQCF1蛋白抗體包裝5g
表戈米辛O(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HClIQCJ蛋白抗體包裝1g
表沒食子兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Manidipine Dihydrochlorid抑制結(jié)合蛋白抗體包裝25g
表沒食子兒茶沒食子酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Manidipine Dihydrochlorid免疫球蛋白超家族成員3抗體包裝5g
表木栓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Stanolone/Androstanolone免疫球蛋白超家族成員6抗體包裝1g
表小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Doramectin免疫球蛋白超家族成員9抗體包裝1g
別隱品堿;A-別隱品堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3,3',5'-Triiodo-L-thyronine免疫球蛋白超家族成員10抗體包裝5g
濱蒿內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Corylifol A大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體包裝1g
檳榔(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bromfenac sodium干擾α受體抗體包裝25g
檳榔花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bromfenac sodium磷化干擾α受體抗體包裝5g
波棱瓜子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flupenthixol dihydrochloride磷化胰島受體β抗體包裝1g
波棱英文名稱: Tea polyphenol核因子κB抑制蛋白E抗體包裝5g
博落回(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetrahydrocurcumin磷化整合β4抗體包裝1g
薄荷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tubuloside A磷化整合β4抗體包裝10MG
補(bǔ)骨脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2'-AcetylacteosideIQCD蛋白抗體包裝100g
伯克霍爾德氏菌Burkholderia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品醌NADH脫氫1試劑盒葫蘆巴堿;Trigonelline
魯錐梗孢Dissoconium│luensis G.Y. Sun X.R.Zhai& Rong Zhang 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員11試劑盒紅花八角;Dunnianol
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品空泡相關(guān)蛋白A試劑盒紅松內(nèi)酯;Pinusolide
Masson三色染色液(固綠法)茯苓 3-氨基-1-金剛烷海藻糖6磷酸合Elisa
閃光須霉 3-溴酮酸乙酯β-基氨酸合成Elisa
米曲霉 DL-α-甲氧基硫酸Elisa
谷氨酸棒桿 3-溴-4-吡啶甲1-氨基-1-羧酸環(huán)烷Elisa
香草蘭根疾 3,5-二溴-4-吡啶甲乙酸氧化Elisa
鞘氨單胞屬 4-甲基-N-氧化物 一水合物維生DElisa
葡萄座腔 4-硝基茴香硫β-硫代葡萄糖苷水解Elisa
蘇云金芽胞桿庫爾斯塔克亞種 2-溴-1-氟-4-色P450Elisa
Marivirga tractuosa 3,4-二甲氧基苯硫酚絲裂原活化蛋白激20Elisa
蠟狀芽孢桿 甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷半水合物原卟啉原氧化Elisa
食樹脂新鞘氨 4-氟-1-茚酮查爾酮還原Elisa
光孢黃叢枝珊瑚 壬基-β-D-吡喃葡糖苷4CL-肉桂酸4-羥基化Elisa
約利曼漆斑 3-氨基-4-吡唑甲酸乙酯天冬酰合成Elisa
金黃色葡萄球金黃亞種 3-氟-5-甲氧基苯甲β內(nèi)酰Elisa
Pseudarthrobacter 雙(三-o-甲苯磷)鈀(0)α半乳糖苷Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)