商品介紹:
Pomalidomide作用于LPS刺激的人PBMC細胞,抑制TNF-α釋放,IC50為13nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:19171-19-8 別名:CC-4047 純度:98.0% 分子量:273.24 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
放射形根瘤菌MD-1蛋白抗體Human PLA2G4B ELISA Kit纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)
炭疽芽胞桿菌MD-2蛋白抗體Human PLA2G4E ELISA Kit纖溶原激活物抑制因子(PAI)
短芽孢桿菌淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)受體抗體Human PLA2G4F ELISA Kit纖溶原激活劑抑制物(PAI-1)
小孢根霉寡孢變種肝臟型脂肪結(jié)合蛋白抗體Human PON3(Serum paraoxonase/lactonase 3) ELISA Kit纖溶原激活劑(PLGA)
谷棒桿菌Ⅰ型熒光抗體Human PLAC1L ELISA Kit纖溶原(Plg)
反卷毛殼亮基肽3抗體Human PLAGL2 ELISA Kit纖溶抗纖溶復合物(PAP)
耳匙菌肝臟型脂肪結(jié)合蛋白抗體Human PKMYT1 ELISA Kit纖溶/纖維蛋白溶(PL/Fbn)
耐寒短桿菌腫瘤抑制基因LPP2抗體Human MAGEC1(Melanoma-associated antigen C1) ELISA Kit纖連蛋白(FN)
異常漢遜酵母腫瘤抑制基因LATS1抗體Human PITX1 ELISA Kit細菌性病(BV)
枯草芽孢桿菌磷化單絲蛋白激1/2抗體Human PITX2 ELISA Kit周期D3(Cyclin-D3)
芥黃蜜環(huán)菌磷化腫瘤抑制基因LATS1抗體Human PIWIL2 ELISA Kit周期D2(Cyclin-D2)
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種磷化絲/蘇蛋白激抗體Human PIWIL1 ELISA Kit周期D1(Cyclin-D1)
貝萊斯芽胞桿菌磷化絲/蘇蛋白激抗體Human PKC iota ELISA Kit周期A2(Cyclin-A2)
圍小叢殼菌磷化絲/蘇蛋白激抗體Human HDL(High-density lipoprotein) ELISA Kit周期蛋白依賴性激2(CDK2)
鐮孢霉黃體激釋放激類似物抗體Human PJA1 ELISA Kit周期蛋白A1(CCNA1)
Winogradskyella pulchriflava 磷化核纖層蛋白A/C抗體Human PKIG ELISA Kit因子信號轉(zhuǎn)導抑制因子3(SOCS-3)
蠟樣芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)棗仁皂苷A
CGMCC1.1969=ATCC33653資源名稱: 最小弧菌 質(zhì)量規(guī)格:化學發(fā)光試劑三七皂苷R1
鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含氮量:9.00-10.30 %連翹苷
TNF-α釋放抑制劑(Pomalidomide)擬青霉 2-氟-4-羥基Q熱Elisa
香菇 3-辛基噻吩間粘附分子1Elisa
釀酒酵母 3-環(huán)己烯-1-羧酸甲酯尿白三烯Elisa
燼灰鏈霉 三異基硅烷CD4分子Elisa
釀酒酵母 N-[3-(乙酰巰基)-(2S)-甲基?;鵠-L-脯氨酸CD8分子Elisa
淺玫瑰鏈霉 1,2-二溴-4,5-二氟苯傳染性胸膜肺炎抗體Elisa
干草鞘氨單胞 1,10-二氨基癸烷魏氏梭(D型)抗體Elisa
金黑小單孢 4-甲基戊酸魏氏梭(A型)抗體Elisa
4-甲乙型腦炎病抗體Elisa
米曲霉 順式-二苯乙烯沙眼衣原體Elisa
*紅城紅球 二乙縮氨基乙肺炎衣原體IgM抗體Elisa
產(chǎn)二鏈霉 1-(2-均苯)-1,3-丁烷二酮沙眼衣原體抗體Elisa
鏈格孢 蘋果?;?/span> 六氟磷酸四乙銅(I)邊蟲病抗體Elisa
玉米大斑病 3,4,5-氧苯海綿狀腦病Elisa
尖孢鐮孢 鄰乙酸伏馬Elisa