詳細(xì)介紹
人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;RKO-E6傳代方法培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡zui大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國(guó)內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。
人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;RKO-E6傳代方法冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品名稱 | 形態(tài)特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
上皮細(xì)胞 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 RKO-E6細(xì)胞系是用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pCMV-E6的結(jié)腸癌RKO細(xì)胞系。 該細(xì)胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細(xì)胞病毒啟動(dòng)子的人乳狀病毒(HPV)E6癌基因。 RKO-E6細(xì)胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的細(xì)胞參數(shù)改變p53介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄和凋亡等。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii
SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
虎皮香菇,漏斗香菇 Lentinus tigrinus
人胃腺細(xì)胞英文名稱:AGS
MG-63, 人骨肉瘤細(xì)胞 Human
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
C4-2(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
爪哇根霉 Rhizopus javanicus
假單胞菌 Pseudomonas sp.
CRT(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
鏈霉菌 Streptomyces sp.
VE(人血管內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum
BEL-7404(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
雪白根霉 Rhizopus niveus
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
Protein G Affinity MagBeads/Protein G 磁性親和純化介質(zhì)0.5ml國(guó)產(chǎn)gersion
暫無(wú) Eupenicillium sp.
黑木耳 Auricularia auricula
中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
小鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii DC4 (50 mg)1,4-bis[4-[(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl)oxy]-4-oxobutyl]-1,4-diazoniabicyclo[2。2。2]octane, dibromide; DC4
15(R)-HEDE (100 ug)15R-hydroxy-11Z,13E-eicosadienoic acid; 15(R)-HEDE
Methylone (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)3,4-Methylenedioxy-N-methylcathinone|M1|bk-MDMA; 1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(methylamino)-1-propanone, monohydrochloride
MDDMA (hydrochloride) (5 mg)N,N,α-trimethyl-1,3-benzodioxole-5-ethanamine, monohydrochloride
Atractyloside (potassium salt) (500 ug)(2β)-15α-hydroxy-2-[[2-O-(3-methyl-1-oxobutyl)-3,4-di-O-sulfo-β-D-glucopyranosyl]oxy]-19-norkaur-16-en-18-oic acid, dipotassium salt
4-Fluorobuphedrone (hydrochloride) (5 mg)4-FBP; 1-(4-fluorophenyl)-2-(methylamino)butan-1-one, monohydrochloride
Ginsenoside Rd (10 mg)20-(β-D-glucopyranosyloxy)-12β-hydroxydammar-24-en-3β-yl 2-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranoside
AZD 5363 (25 mg)4-amino-N-[(1S)-1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl]-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-4-piperidinecarboxamide
W-18 (10 mg)4-chloro-N-[1-[2-(4-nitrophenyl)ethyl]-2-piperidinylidene]-benzenesulfonamide
AG-538 (5 mg)(αE)-[(3,4-dihydroxyphenyl)methylene]-3,4-dihydroxy-β-oxo-benzenepropanenitrile
Rucaparib (5 mg)AG-047; 8-fluoro-1,3,4,5-tetrahydro-2-[4-[(methylamino)methyl]phenyl]-6H-pyrrolo[4,3,2-ef][2]benzazepin-6-one