產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PLK1抑制劑(Ro3280)
英文名稱:Ro3280
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
RO3280是高活性PLK1抑制劑,IC50為3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1062243-51-9 純度:99.85% 分子量:543.61 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
解淀粉芽孢桿菌人Ⅰ型膠原C端肽Anti-PSer 10 Histone H3 Antibody人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因
pET-22(b) 大鼠脂蛋白磷脂A2Anti-PSMD11 Antibody人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因
玫煙色棒束孢小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3Anti-PSMD3 Antibody人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)
總狀共頭霉人粘蛋白/粘液5ACAnti-PSMD12 Antibody人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)
茶藨子葡萄座腔菌大鼠熱休克蛋白90Anti-PSMD6 Antibody人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)
短小芽孢桿菌人轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)Anti-PSMD3 Antibody人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)
奇異變形菌大鼠熱休克蛋白70Anti-PTEN Antibody人α1β糖蛋白(α1β-GP)
雙生柱孢(三七黃腐病菌)小鼠補(bǔ)體蛋白4Anti-PTGES3 Antibody人α1β糖蛋白(α1β-GP)
粘孢白僵菌小鼠腎Anti-PTGDR2 Antibody人可溶性髓系觸發(fā)受體-1(sTREM-1)
挪威脫硫微菌大鼠熱休克蛋白40Anti-PTGDR Antibody人可溶性髓系觸發(fā)受體-1(sTREM-1)
終腐霉人天門冬轉(zhuǎn)/谷草轉(zhuǎn)Anti-PTGFRN Antibody人肌抑(MSTN)
地衣芽孢桿菌大鼠熱休克蛋白20Anti-PTGIS Antibody人肌抑(MSTN)
大腸埃希菌人肝脂Anti-PTGS2 Antibody人黑瘤衍生亮鏈額外核因子(MLZE)
秦氏蜜環(huán)菌小鼠α2抗纖溶Anti-PTH Antibody人黑瘤衍生亮鏈額外核因子(MLZE)
食爬蟲假單胞菌小鼠α2纖溶抑制物Anti-PTGR2 Antibody人二磷尿核苷葡糖基轉(zhuǎn)移2家族肽B4(UGT2B4)
杰氏假單胞菌人乙酰肝Anti-PTH2 Antibody人二磷尿核苷葡糖基轉(zhuǎn)移2家族肽B4(UGT2B4)
微管蛋白特定伴侶蛋白E抗體粘鞭霉小鼠骨髓來(lái)源樹突狀細(xì)胞
Tudor結(jié)構(gòu)域蛋白TDRD3抗體榆黃蘑人舌鱗狀上皮細(xì)胞癌
線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位8A/耳聾/肌張力障礙肽抗體山茶大鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞
跨膜蛋白158抗體金黃殼囊孢人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)
PLK1抑制劑(Ro3280)黃褐松口蘑 FMOC-D-絲
枯草芽胞桿 FMOC-L-絲
海南紅豆根瘤 FMOC-D-脯
Cupriavidus FMOC-L-脯
球黑孢霉 FMOC-D-甲硫
痢疾志賀氏 FMOC-L-甲硫
豇豆慢生根瘤 FMOC-D-亮
蕓薹鏈格孢 FMOC-L-亮
紅須腹 FMOC-L-異亮
鏈霉 FMOC-L-甘
鏈霉 Fmoc-D-天冬酰
根瘤 Fmoc-L-天冬酰
產(chǎn)朊假絲酵母 FMOC-L-谷氨酰
釀酒酵母 FMOC-L-天冬
變幻青霉 FMOC-D-苯
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)