商品介紹:
P005091是一種有效的,選擇性的泛素特異性蛋白酶7(USP7)抑制劑,EC50值為4.2μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):882257-11-6 別名:P5091 純度:98.26% 分子量:348.22 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):(USP7抑制劑(P005091)
英文名稱(chēng):P005091
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
棒彎孢線(xiàn)粒體融合蛋白1抗體Human MDH1 ELISA Kit離子胞內(nèi)通道蛋白4(CLIC4)
白腐菌O6甲基鳥(niǎo)嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移抗體Human ALDH1A1(Retinal dehydrogenase 1) ELISA Kit卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)
炭疽盤(pán)孢菌肌肉骨骼受體酪激抗體Human MDMX ELISA Kit卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)
仁果叢梗孢結(jié)核分枝桿菌抗體Human MDM2 ELISA Kit卵泡抑樣蛋白1(FSTL-1)
枯草芽孢桿菌膜相關(guān)環(huán)指蛋白1抗體Human MED15 ELISA Kit卵泡抑(FS)
冷海希瓦氏菌膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體Human MED17 ELISA Kit卵磷脂膽固?;D(zhuǎn)移(LCAT)
費(fèi)氏中華根瘤菌膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體Human SLIT2(Slit homolog 2 protein) ELISA Kit卵巢癌抗原X1(OVX1)
肉座菌屬膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體Human MCCC1 ELISA Kit硫氧化還原蛋白(Trx)
大黃歐文氏菌膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體Human MCCC2 ELISA Kit硫氧還蛋白域包含蛋白6(TXNDC6)
沙漠畢赤酵母膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體Human MCEE ELISA Kit硫氧還蛋白還原(TrxR)
粗柄白蘑激-M2Human MCM10 ELISA Kit硫乙酰肝蛋白多糖2(HSPG2)
扣囊復(fù)膜孢酵母間皮抗體Human MCM3(Minichromosome maintenance complex component 3) ELISA Kit硫褪黑色(MS)
巴氏醋桿菌基質(zhì)金屬蛋白-1抗體Human MCM8 ELISA Kit硫軟骨蛋白聚糖5(CSPG5)
微球菌基質(zhì)金屬蛋白-1抗體Human MCM-BP ELISA Kit硫軟骨N-乙酰半乳糖基轉(zhuǎn)移1(CSGALNACT1)
美澳型核果褐腐病菌基質(zhì)金屬蛋白13抗體Human MCM4 ELISA Kit硫軟骨(CS)
考克氏菌基質(zhì)金屬蛋白-14抗體Human MCRS1 ELISA Kit硫皮膚-硫軟骨PG(DSCSPG)
嗜冷海桿菌Marinobacter│psychrophilus 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR羊藿苷
: F263資源名稱(chēng): 米曲霉 質(zhì)量規(guī)格:>98%延胡索乙
嗜熱脂肪地芽抱桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,粒徑20nm對(duì)香豆
(USP7抑制劑(P005091)炭疽芽孢桿 -4-甲酸甲酯天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa
葡萄座腔 1-苯乙基-4-酮轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2Elisa
擬盤(pán)多毛孢Y9 對(duì)溴叔丁基苯白介17AElisa
唐菖蒲伯克霍爾德氏 2-甲氧基乙氧基Ⅲ型膠原蛋白Elisa
白丘鏈霉 間苯二甲酸二甲酯-5-磺酸鈉糖化血紅蛋白Elisa
球孢白僵 (R)-(-)-聯(lián)萘酚磷酸酯組織蛋白KElisa
根瘤 (R)-(-)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯乙酰糖類(lèi)抗原50Elisa
Tarimoccocus (-)-(1S,4R)-坎烷酰惡性腫瘤特異性生長(zhǎng)因子Elisa
密枝瑚 四溴噻吩細(xì)小病Elisa
根瘤 4-甲酰乳鐵蛋白Elisa
魯氏不動(dòng)桿 2-氟苯甲谷氨酸Elisa
雷斯廷加假絲酵母 2-氟-4-甲氧基γ氨基丁酸Elisa
釀酒酵母 4-氟-2-酚超氧化物歧化Elisa
硫磺 2-硝基-4-(三氟甲基)苯甲總抗氧化能力Elisa
烯霉鏈霉 4-氟-2-甲酸4-羥基壬烯Elisa