產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CDK9,CDK8和CDK7抑制劑(LY2857785)
英文名稱:LY2857785
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
LY2857785是一種I型可逆的ATP競爭性的CDK9,CDK8和CDK7抑制劑,IC50分別為11nM,16nM和246nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1619903-54-6 純度:98.59% 分子量:448.6 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
枯草芽孢桿菌驢抗豚鼠IgG抗血清Anti-RASA1 Antibody基質(zhì)金屬蛋白20(MMP20)
柯達酵母屬羊抗牛IgG抗血清Anti-RBFOX2 Antibody基質(zhì)金屬蛋白2(MMP2)
靈芝兔抗牛IgG抗血清Anti-RASAL1 Antibody基質(zhì)金屬蛋白19(MMP19)
Paraburkholderia sp.羊抗牛IgGAnti-RBBP4 Antibody(PB0845)基質(zhì)金屬蛋白17(MMP17)
熒光假單胞菌小鼠抗牛IgGAnti-RBL1 Antibody基質(zhì)金屬蛋白16(MMP16)
釀酒酵母兔抗牛IgGAnti-RBL2 Antibody基質(zhì)金屬蛋白15(MMP15)
芽孢桿菌羊抗雞IgGAnti-RBM47 Antibody基質(zhì)金屬蛋白14(MMP14)
三葉草根瘤菌兔抗雞IgGAnti-RBMS3 Antibody基質(zhì)金屬蛋白13(MMP13)
產(chǎn)黃青霉小鼠抗雞IgY抗體Anti-RBP4 Antibody基質(zhì)金屬蛋白12(MMP12)
芽孢桿菌屬兔抗犬IgM抗體Anti-RBP4 Antibody基質(zhì)金屬蛋白10(MMP10)
珊瑚鏈霉菌羊抗小鼠IgGAnti-RBPMS Antibody基質(zhì)金屬蛋白1(MMP1)
冷海水黃桿菌驢抗羊IgGAnti-RBX1 Antibody基質(zhì)Gla蛋白(MGP)
弗雷德里克斯堡假單胞菌羊抗兔IgGAnti-RBPJ Antibody基膜聚糖(LUM)
墨汁鬼傘兔抗羊IgGAnti-RCC1 Antibody肌脂蛋白(SLN)
新月彎孢兔抗羊IgG抗血清Anti-REA/PHB2 Antibody肌長蛋白(SSPN)
釀酒酵母小鼠抗豚鼠IgGAnti-RDX Antibody肌原纖蛋白3(FBN3)
神經(jīng)細胞分化因子2抗體藍色犁頭霉(斜面)小鼠胎兒真皮成纖維細胞提取物
膜相關(guān)蛋白樣蛋白NUMBL抗體短刺小克銀漢霉小鼠視網(wǎng)膜色上皮細胞提取物
胞內(nèi)活化的Notch1蛋白抗體乳克魯維酵母小鼠小梁網(wǎng)細胞提取物
神經(jīng)鈣傳感蛋白1抗體阪崎克羅諾桿菌小鼠晶狀體上皮細胞提取物
CDK9,CDK8和CDK7抑制劑(LY2857785)黑腐皮殼屬 β-谷甾
平菇(白鮑魚菇) 靈芝酸SZ
解脂假絲酵母 柘樹咕噸酮B
藍灰色異壁放線 反式-1,2-環(huán)己二四乙酸
葡萄座腔 乙酸雷公藤內(nèi)酯A
腸膜明串珠右旋葡聚糖亞種
釀酒酵母 伊博格堿
蠟狀芽孢桿 香茶菜乙
金黃色葡萄球 3-氨基氧基硅烷
阿德利長西氏酵母 齒孔
釀酒酵母 槐定堿
彭氏變形桿 2′,3′-二脫氧胸苷
釀酒酵母 竹葉椒堿
不動桿 重樓皂苷VII
黑曲霉 黃獨D
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)