CK1ε抑制劑(PF-670462)公司正在出售的產(chǎn)品：HO-1/HSP32/FITC 熒光標(biāo)記血紅氧合-1/熱休克蛋白-32抗體IgG溴化亞銅 AR,99.0%
HO-1/HSP32/FITC 熒光標(biāo)記血紅氧合-1/熱休克蛋白-32抗體IgG溴化亞銅 CP,99.0%
HO-2/FITC 熒光標(biāo)記血紅氧合-2抗體IgG溴化亞銅 99.99% metals basis
HOXA10 /FIT

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

凍土毛霉小鼠顆粒BAnti-PRPF18 Antibody人白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)

谷棒桿菌人幽門螺桿菌相關(guān)基因蛋白A-IgGAnti-PROCR Antibody人白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)

茄病鐮刀菌大鼠P53Anti-PRPF31 Antibody人C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)

粘質(zhì)沙雷氏菌人粘蛋白/粘液7Anti-PRPF19 Antibody人C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)

澳型核果褐腐病菌大鼠環(huán)磷鳥苷Anti-PRPF39 Antibody人假定蛋白LOC677168

總狀共頭霉小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1Anti-PRPF39 Antibody人假定蛋白LOC677168

擬莖點霉大鼠一氧化氮合成Anti-PRPH Antibody人淋巴抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)

Pantoea eucalypti大鼠Y-谷酰轉(zhuǎn)肽Anti-PRPF38A Antibody人淋巴抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)

傘枝梨頭霉小鼠顆粒AAnti-PRSS1 Antibody人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員1(EAR1)

淡青鏈霉菌小鼠淋巴趨化因子Anti-PRSS33 Antibody人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員1(EAR1)

詹氏桿菌人Ⅰ型前膠原N端前肽Anti-PRSS3 Antibody人混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)

黑木耳大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成Anti-PRPH Antibody人混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)

大腸埃希菌大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成Anti-PSG1 Antibody人過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)

貝葉多孔菌人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Anti-PSEN1 Antibody人過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)

馬賽菌小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2Anti-PSKH1 Antibody人類似cDNA順序BC027382

蠟狀芽孢桿菌小鼠末端補體復(fù)合物C5b-9Anti-PSMD11 Antibody人類似cDNA順序BC027382

味覺受體蛋白家族2亞基7抗體叢片韌革菌TE-9 人食管癌細(xì)胞

味覺受體蛋白家族2亞基50抗體李木層孔菌人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞

跨膜蛋白59抗體翹鱗傘膽管上皮癌細(xì)胞

TATA結(jié)合蛋白TBP抗體古巴光蓋傘小鼠T淋巴瘤細(xì)胞（雞OVA基因修飾）
CK1ε抑制劑(PF-670462)銳頂鐮孢 芴甲氧羰酰

嗜鹽鹽單胞 阿斯巴甜

鐮雄腐霉 D-別異亮

白囊耙齒 L-高絲

短桿狀馬賽 L-叔亮

Mumia flava L-谷-5-甲酯

枯草芽孢桿 L-天門冬鈣

棉花枯萎病 Z-甘氨酰-L-脯氨酰-L-精氨酰對醋酸鹽

嗜熱鏈球 D-纈氨酰-L-白氨酰-L-賴對

大豆慢生根瘤 N-苯甲酰-L-纈氨酰甘氨酰-L-精對鹽酸鹽

熱吸水鏈霉銹赤亞種 FMOC-D-纈

斯氏土地桿 FMOC-D-色

蝕脈鐮孢尖銳變種 FMOC-L-色

直桿糖多孢 FMOC-L-蘇

腐皮殼 Fmoc-L-羥脯