產(chǎn)品屬性:
中文名稱:COX-2抑制劑(Parecoxib)
英文名稱:Parecoxib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Parecoxib是選擇性COX-2抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):198470-84-7 別名:SC 69124 純度:99.14% 分子量:370.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
枯草芽孢桿菌β2微球蛋白抗體(單抗)Human GPRIN3 ELISA Kit小鼠二(MDA)免疫試劑盒
豬丹絲菌骨/軟骨蛋白多糖1抗體Human GPR17 ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)(ALT/GPT)免疫試劑盒
黃曲霉染色體相關(guān)蛋白CAP抗體Human GPR177 ELISA Kit小鼠表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)免疫試劑盒
谷棒桿菌Bcl-2同源結(jié)構(gòu)域樣蛋白1抗體Human GPX4 ELISA Kit小鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)免疫試劑盒
禾谷鐮孢菌Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體Human GPR183(G-protein coupled receptor 183)ELISA Kit小鼠(LPA)免疫試劑盒
局限青霉半乳糖轉(zhuǎn)移7亞基β1,4抗體Human GPR162 ELISA Kit小鼠胞外超氧化物歧化[Cu-Zn](SOD3)免疫試劑盒
稻黑孢菌BEN結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Human GPR177 ELISA Kit小鼠胞內(nèi)氯離子通道蛋白1(CLIC1)免疫試劑盒
副溶血弧菌巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體Human GPR17 ELISA Kit小鼠胞漿型磷脂A2(cPLA2)免疫試劑盒
小青霉癌相關(guān)蛋白1抗體Human GPR183(G-protein coupled receptor 183)ELISA Kit小鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)免疫試劑盒
普通鐮刀菌腦蛋白CG6抗體Human GPR3 ELISA Kit小鼠半乳糖凝集-3(Gal-3)免疫試劑盒
果形正青霉晶狀體蛋白2抗體Human GPR22 ELISA Kit小鼠半乳糖6硫酯(Gal-6S)免疫試劑盒
假結(jié)核耶爾森氏菌7號(hào)染色體開放閱讀框27抗體Human GPR35(G-protein coupled receptor 35) ELISA Kit小鼠半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)免疫試劑盒
土地桿菌癌膜相關(guān)蛋白101抗體Human GPR58/TAAR2 ELISA Kit小鼠百日咳病IgG抗體免疫試劑盒
哈茨木霉立即早期癌基因BRLF1抗體(鼻咽癌基因)Human GPR50 ELISA Kit小鼠百白破抗體免疫試劑盒
曲霉腦源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體Human GPR105 ELISA Kit小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌β淀粉樣前體蛋白裂解2抗體Human GPR81 ELISA Kit小鼠白血病抑制因子(LIF)免疫試劑盒
關(guān)節(jié)炎諾卡氏菌Nocardia│arthritidis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRβ內(nèi)啡肽受體試劑盒肉蓯蓉苷A
短刺小克銀漢霉Cunninghamella│blakesleana 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRβ內(nèi)啡肽試劑盒瑞香二
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>97%,分子生物學(xué)級(jí)β-連環(huán)蛋白試劑盒瑞香-7-
COX-2抑制劑(Parecoxib)五味子酯乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Protodioscin神經(jīng)元特異性烯化/γ 烯化抗體包裝250mg
五脂A1英文名稱: Protosappanin B神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3前蛋白抗體包裝5g
五指柑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Polygalacic acid核受體相關(guān)因子-1抗體包裝1g
五指毛桃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Senegenin核因子2相關(guān)因子2抗體包裝5g
西北甘草異黃英文名稱: Myrcene神經(jīng)纖毛蛋白1抗體包裝25g
西貝母堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Narirutin神經(jīng)生長(zhǎng)因子4/5抗體包裝5g
西貝母堿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Alisol B 23-acetate巢蛋白NID2抗體包裝1g
西伯利亞遠(yuǎn)志口山B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sweroside線粒體鈉/氫交換蛋白質(zhì)2抗體包裝250mg
西伯利亞遠(yuǎn)志糖A5英文名稱: Swertiamarin神經(jīng)元1抗體包裝5g
西伯利亞遠(yuǎn)志糖A6英文名稱: Camphor神經(jīng)肽Y抗體包裝1g
西藏棱子芹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sesamolin神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體包裝250mg
西河柳(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sesamin谷受體2B抗體包裝25g
西紅花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sesamin神經(jīng)纖毛蛋白2抗體包裝5g
西紅花苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Quercetin 3-O-glucoside-7-O-rhamnoside谷受體2D抗體包裝1g
西紅花苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Timosaponin A3原癌基因N-Ras抗體包裝250mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)