Wortmannin(PI3K抑制劑)公司*的產(chǎn)品：Phospho-PSD93 (Tyr340) /FITC 熒光標(biāo)記化突觸后密度蛋白93抗體IgGH-Asp(OtBu)-2-Chlorotrityl Resin 0.3~0.8 mmol/g,100~200 mesh
PSD-95/FITC 熒光標(biāo)記突觸后密度蛋白95抗體IgGFmoc-D-Ala-Wang resin 100-200m

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Wortmannin(PI3K抑制劑)

英文名稱：Wortmannin

產(chǎn)品規(guī)格：0.5mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

橙色標(biāo)樁菌間隙連接蛋白29抗體Human EPSTI1 ELISA Kit兔子α2巨球蛋白(A2M)免疫試劑盒

平菇間隙連接蛋白29抗體Human ERAL1 ELISA Kit兔子VGF神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌表面趨化因子受體7抗體Human EPAC1(Exchange protein directly activated by cAMP 1) ELISA Kit兔子S100蛋白(S-100)免疫試劑盒

雙孢蘑菇神經(jīng)母瘤源性分泌蛋白抗體Human ERAP2(Endoplasmic reticulum aminopeptidase 2) ELISA Kit兔子S100B蛋白(S-100B)免疫試劑盒

紙葡萄穗霉染色質(zhì)修飾蛋白2B抗體Human ENDOG(Endonuclease G) ELISA Kit兔子L選擇(L-Selectin)免疫試劑盒

乳乳球菌乳亞種骨架相關(guān)蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B抗體Human EPAC2 ELISA Kit兔子E選擇(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒

芽孢桿菌屬神經(jīng)蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN5抗體Human ENO3 ELISA Kit兔子D-乳 免疫試劑盒

雙通道計(jì)時(shí)定時(shí)器 神經(jīng)蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN8抗體Human EPB41L1 ELISA Kit兔子D二聚體(D2D)免疫試劑盒

Pseudomonas taiwanensiscereblon蛋白抗體Human ENOPH1 ELISA Kit兔子Dickkopf 1(DKK1)免疫試劑盒

友好戈登氏菌補(bǔ)體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白5抗體Human ENOX2 ELISA Kit兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒

康寧木霉胞苷尿苷鳥苷結(jié)合蛋白1抗體Human ENPP4 ELISA Kit兔子CD34分子(CD34)免疫試劑盒

分枝節(jié)桿菌原腸胚雙向形成相關(guān)蛋白抗體Human ENOX1 ELISA Kit兔子B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒

蠟狀芽孢桿菌分裂周期蛋白CDC123抗體Human ENPP6 ELISA Kit兔子8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)免疫試劑盒

大腸埃希菌神經(jīng)蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體Human ENPP5 ELISA Kit兔子6-前列腺F1α(6-keto-PGF1α)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)趨化樣因子超家族成員3抗體Human ENSA ELISA Kit兔子Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒

游動(dòng)微菌染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體Human ENTPD2 ELISA Kit兔子4-羥基壬烯(HNE)免疫試劑盒

柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSTEAP家族成員1試劑盒棉籽糖

河生腸桿菌Enterobacter│amnigenus 質(zhì)量規(guī)格：>50%，Ind GradeStathmin 1試劑盒馬來

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>50%,BSSTAT3蛋白抑制分子試劑盒麥冬皂苷B
Wortmannin(PI3K抑制劑)細(xì)孢毛霉 3-(3-吡啶基)-L-氨酸骨成型蛋白受體ⅡElisa

球孢白僵 3-羥基鹽酸鹽骨鈣Elisa

木賊鐮孢 D(+)-乳糖一水合物骨堿性磷酸Elisa

仙人掌有孢漢遜酵母 3,4-二甲氧基苯酸骨橋Elisa

薔薇生鏈格孢 叔丁氧羰?；?-氨基己酸骨特異性堿性磷酸Elisa

異常畢赤酵母 二甲基二乙氧基硅烷骨特異性堿性磷酸BElisa

大麗輪枝孢 三苯基膦氫鹽骨涎蛋白Elisa

硫磺（硫色多孔） 2,5-二苯酸骨原交聯(lián)Elisa

瓶霉屬 血清胸腺因子固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白Elisa

馬德里毛殼 4-氨基-3-甲固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1Elisa

大腸埃希氏(大腸桿) 2,5-二氟苯酸固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1cElisa

柿盤多毛孢 5-溴-8-硝基異喹啉固膽固轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NPC1L1Elisa

毛耳白背 乙酸錳胱硫β-合成Elisa

沼澤紅假單胞 2,4-二氟苯酸過氧化氫Elisa

弓形蟲(GT0株) 苯基膦過氧化物Elisa