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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566培養(yǎng)

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更新時(shí)間:2017-03-08 12:30:18瀏覽次數(shù):433

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566培養(yǎng)售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人宮頸癌細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!

細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566培養(yǎng)
形態(tài)特性  上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin,經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:x,x;CSF1PO:7,10;D12S391:17,21;D13S317:10,12;D16S539:11,13;D18S51:17,17;D19S433:12,13;D21S11:29,30;D2S1338:16,16;D3S1358:12,19;D5S818:10,11;D6S1043:13,13;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:18,23;Penta E:13,14;TH01:8,8;TPOX:8,8;vWA:17,22;
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566培養(yǎng)注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

4,4-二碘聯(lián)英文名稱:4,4-twoCAS號(hào):3001-15-8分子式:406分子量:C12H8I2

2-乙炔吡啶英文名稱:2-acetyleneCAS號(hào):1945-84-2分子式:103.12分子量:C7H5N

3-胺聯(lián)英文名稱:3-anilinegroupCAS號(hào):198275-79-5分子式:245.33分子量:C18H15N

2--4-甲氧嘧啶英文名稱:2--4-,aCAS號(hào):22536-63-6分子式:144.56分子量:C5H5ClN2O

二并[g,p]稠二萘英文名稱:Twobenzeneand[g,p]fusedtwonaphthaleneCAS號(hào):191-68-4分子式:328.41分子量:C26H16

2-喹啉英文名稱:2-hydrazineCAS號(hào):15793-77-8分子式:159.19分子量:C9H9N3

四氮唑英文名稱:TetrazoleCAS號(hào):288-94-8分子式:70.05分子量:CH2N4

(2,4-戊二酮)錳二水合物英文名稱:Double(2,4-pentanedione)MntwohydrateCAS號(hào):14024-58-9分子式:253.16分子量:C10H14MnO4·2H2O

3-氯吲唑英文名稱:3-indazolechlorideCAS號(hào):29110-74-5分子式:152.58分子量:C7H5ClN2

2,4-滴異辛酯分子式:333.25分子量:C16H22Cl2O3英文名稱:2,4-dropsofisooctylCAS號(hào):25168-26-7

四亞甲亞砜英文名稱:MethylenefourCAS號(hào):1600-44-8分子式:104.17分子量:C4H8OS

芒果苷分子式:422.34分子量:C19H18O11英文名稱:MangoCAS號(hào):4773-96-0

2--5-硝吡啶英文名稱:2--5-nitropyridineCAS號(hào):4548-45-2分子式:158.54分子量:C5H3ClN2O2

1,8-桉葉素分子式:154.25分子量:C10H18O英文名稱:1,8-EucalyptusCAS號(hào):470-82-6

靛酚藍(lán)分子式:276.33分子量:C18H16N2O英文名稱:IndophenolblueCAS號(hào):132-31-0

蒼術(shù)素分子式:182.22分子量:C13H10O英文名稱:AtractylodinCAS號(hào):55290-63-6

3-溴丙烯分子式:120.98分子量:C3H5Br英文名稱:3-bromideCAS號(hào):106-95-6

二氫辣椒素分子式:307.43分子量:C18H29NO3英文名稱:TwohydrogencapsaicinCAS號(hào):19408-84-5

赫斯特?zé)晒馊剂希?/span>33342分子式:561.93分子量:C27H28N6O·3HCl·xH2O英文名稱:Hearstfluorescentfuel,33342CAS號(hào):23491-52-3 T84(人結(jié)腸腺肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

293T(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

大鼠卵巢顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

Hacat(人永生角質(zhì)形成細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

myc標(biāo)簽免疫親和介質(zhì)125ul國產(chǎn)gersion

SGC7901(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IV型膠原酶(100mL酶解緩沖液)10mL

CT26.WT(小鼠結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

GES-1全細(xì)胞裂解液100ug100ug

小鼠胃粘膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

BEL-7404(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠垂體瘤細(xì)胞英文名稱:MMQ

尼氏(Nissl)染色液規(guī)格:100ml

人胃細(xì)胞英文名稱:MGC-803

LM-137瓊脂/LM-137 Agar膜濾法單增李氏菌的選擇性分離250克國產(chǎn)/進(jìn)口

人盲腸腺細(xì)胞(未分)英文名稱:Hce-8693

產(chǎn)毒培養(yǎng)基/Toxin-Producing Medium青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

人表黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

抗生素Ⅴ號(hào)培養(yǎng)基/抗生素5號(hào)培養(yǎng)基/Antibiotic Agar NO.5抗生素微生物的效價(jià)測(cè)定250克國產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠腎足突細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566培養(yǎng)去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽瓊脂/脫氧膽酸鈉枸櫞酸鹽瓊脂/Desoxycholate Citrate Agar細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和分離培養(yǎng),沙門氏菌分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

Western中低分子量蛋白Marker20次國產(chǎn)

胰蛋白胨/胰蛋白胨/TryptoneBR250/500克國產(chǎn)/進(jìn)口

Saos-2,人成骨肉瘤細(xì)胞

LA795(小鼠肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

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