商品介紹:
THZ2是一種有效的,選擇性的CDK7抑制劑,IC50值為13.9nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1604810-84-5 純度:99.74% 分子量:566.05 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CDK7抑制劑(THZ2)
英文名稱:THZ2
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
豬丹絲菌Ki67蛋白抗體Human PLCD3 ELISA Kit銜接蛋白活化因子1(APAF1)
釀酒酵母離子通道蛋白EAG1抗體Human PLCD4 ELISA Kit酰基化饑餓(AG)
蘇云金芽胞桿菌轉(zhuǎn)染抑癌基因KLF6抗體Human Plexin B2 ELISA Kit?;さ鞍?ASP)
盤長(zhǎng)孢狀盤孢KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體Human PLCH1 ELISA Kit纖維母生長(zhǎng)因子受體1癌基因伴侶(FGFR1OP)
枯草芽孢桿菌胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體Human PLCL2 ELISA Kit纖維母表面抗原(FSP)
異常漢遜酵母磷化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體Human PLCD4 ELISA Kit纖維連接相關(guān)抗原(FRA)
枯草芽孢桿菌磷化抑癌蛋白EZH2抗體Human Plexin B2 ELISA Kit纖維連接蛋白(FN)
大腸埃希菌AEG-1抗體Human PLCH1 ELISA Kit纖維介蛋白(fgl2)
桔青霉白介6抗體Human PLCL2 ELISA Kit纖維膠凝蛋白3(FCN3)
小單孢菌低密度脂蛋白抗體Human PLCH1 ELISA Kit纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)
金黃色葡萄球菌LRRC19蛋白抗體Human PLCL2 ELISA Kit纖維蛋白原α鏈(FGA)
麥根腐平臍蠕孢層粘連蛋白受體1單克抗體Human PLA2G4F ELISA Kit纖維蛋白原(Fb)
粉紅鐮刀菌層粘連蛋白受體1單克抗體Human PLA2G4E ELISA Kit纖維蛋白溶(PL/Fbn)
盔形畢赤酵母T活化連接蛋白抗體Human PON3(Serum paraoxonase/lactonase 3) ELISA Kit纖維蛋白(Fibrin)
弗雷德里克斯堡假單胞菌LIX1抗體Human PLAC1L ELISA Kit纖調(diào)蛋白(FMOD)
單格孢屬凝集樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體Human PLAGL2 ELISA Kit纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)白樺脂
球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T)棗仁皂苷D
玉蜀黍赤霉(麥類赤霉病菌)Gibberella│zeae 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)棗仁皂苷B
CDK7抑制劑(THZ2)釀酒酵母 N,O-二甲基羥鹽酸鹽表皮生長(zhǎng)因子受體Elisa
紅蠟盤 2-溴苯甲1,25-二羥基維生D3Elisa
芽孢桿 2-溴-4-酚嗜鉻蛋白AElisa
嗜冷桿 4-吡啶乙酸鹽酸鹽中間α球蛋白抑制因子H4Elisa
枯草芽孢桿 4-甲基硫代氨基脲富組氨酸糖蛋白Elisa
釀酒酵母 2-甲氧基苯脂多糖結(jié)合蛋白Elisa
匍枝根霉原變種 4,5-二甲基-2-異丁基噻唑啉降鈣Elisa
豇豆慢生根瘤 2--N-琥珀酰亞基碳酸酯甲狀旁腺Elisa
香菇 乙酸硫噻唑骨鈣Elisa
紅細(xì)屬 2,4,6-三異基苯磺酰分泌磷蛋白2Elisa
釀酒酵母 2-氟茴香硫去甲腎上腺Elisa
硬水黃桿 對(duì)氨基水楊酸呼腸孤病抗體Elisa
大腸埃希 4-氨基-2-(三氟甲基)苯甲過氧化脂質(zhì);乳過氧化物Elisa
米曲霉 DL-2,4-二氨丁酸.色C氧化Elisa
土壤黃桿 異丁酸麥芽酚酯銅鋅-過氧化物岐化Elisa