詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:NF-kB抑制劑(IMD-0354)
英文名稱:IMD-0354
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
IMD-0354是一種合成的選擇性NF-kB抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):978-62-1 純度:99.94% 分子量:383.67 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
耐多抗諾氏菌大鼠P物質(zhì)Anti-PRKAR1A Antibody人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因
長(zhǎng)孢洛德酵母大鼠αL巖藻糖苷Anti-PRKAG2 Antibody人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因
卷枝毛霉卷枝變型小鼠γ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16Anti-PRKAR1B Antibody人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因
安大略假絲酵母人肺炎支原體抗體Anti-PRKAR2A Antibody人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因
泡盛曲霉人肺炎衣原體抗體Anti-PRKD1 Antibody人ras同源物基因家族成員b(RHOB)
阿爾通山堿線菌大鼠甲狀腺過氧化物Anti-PRKCZ Antibody人ras同源物基因家族成員b(RHOB)
膠孢小鼠基質(zhì)衍生因子1aAnti-PRKCD Antibody人假定蛋白LOC677340
食吡啶紅球菌小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子Anti-PRKCSH Antibody人假定蛋白LOC677340
香菇大鼠胰島Anti-PRKDC Antibody人假定蛋白LOC433328
大腸埃希菌人肺耐藥蛋白Anti-PRKG1 Antibody人假定蛋白LOC433328
釀酒酵母人α1抗胰糜蛋白Anti-PRKG2 Antibody人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88(MYD88)
黃傘大鼠抗IgE受體抗體Anti-PRKG2 Antibody人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88(MYD88)
中孢短芽孢桿菌小鼠血漿α顆粒膜蛋白Anti-PRKX Antibody人干擾活化基因205(Ifi205)
普雷恩毛霉大鼠抗IVIgG抗體Anti-PRKN Antibody人干擾活化基因205(Ifi205)
芹側(cè)耳(杏鮑菇)人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白AAnti-PROKR1 Antibody人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)
哈氏弧菌小鼠髓過氧化物Anti-PRKY Antibody人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)
TBR1蛋白抗體硫色鐮刀菌KYSE180 人食管鱗癌細(xì)胞
感光細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子TULP3抗體枝狀枝孢KYSE140 人食管鱗癌細(xì)胞
TSK蛋白抗體擬土黃紅菇SNU119 人卵巢癌細(xì)胞
味覺受體蛋白家族2亞基5抗體茶銀耳A1847 人卵巢癌細(xì)胞
NF-kB抑制劑(IMD-0354)嗜水氣單胞 芴甲氧羰?;?N-甲基-L-纈
阿姆斯特丹曲霉 芴甲氧羰基-N-三苯甲基-L-組
韋司梅擬盤多毛孢 芴甲氧羰基-S-乙酰氨甲基-L-半胱
白杯絲座孢 芴甲氧羰基-N-三苯甲基-D-半胱
紫杉木齒 多巴鹽酸鹽
枯草芽胞桿 王樹脂
葛氏沙雷氏 三苯甲基樹脂
大腸埃希氏 Rink Amide AM樹脂
大腸埃希 Rink-Amide樹脂
釀酒酵母 聚苯乙烯樹脂
綠色木霉=木木霉 甲基樹脂
釀酒酵母 4-甲苯氫樹脂
茯苓 羥甲基樹脂
弗蘭克氏 2-三苯甲基樹脂
枯草芽孢桿 氨基樹脂