商品介紹:
LY2784544是一種有效的JAK2抑制劑,IC50為3nM。LY2784544也抑制FLT3,F(xiàn)LT4,F(xiàn)GFR2,TYK2和TRKB,IC50分別為4,25,32,44和95nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1229236-86-5 別名:gandotinib 純度:98.44% 分子量:469.94 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
JAK2抑制劑(LY2784544) | LY2784544 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
溴敵對(duì)照液辣椒受體樣蛋白1抗體Anti-HGF Antibody尾加壓2受體(UTS2R)
紋黑蛋巢谷酰轉(zhuǎn)1抗體Anti-HHEX Antibody維生D受體(VDR)
福氏志賀氏菌T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)蛋白1抗體Anti-HGF Antibody維生D5(VD5)
釀酒酵母腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白2(TNFα-IP 2)抗體Anti-HGS Antibody維生B9(VB9)
早熟禾鐮孢味覺(jué)受體蛋白家族2亞基16抗體Anti-HIF-1 alpha/HIF1A Antibody維甲誘導(dǎo)基因1蛋白(RIG1)
黃海海桿狀菌線粒體硫氧還蛋白2抗體Anti-HHEX Antibody維甲受體應(yīng)答基因1(RARRES1)
暗擬莖點(diǎn)霉腫瘤壞死因子受體超家族成員5抗體Anti-HIF-2-alpha/EPAS1 Antibody維甲受體γ(RARγ)
水堿菌瞬時(shí)表達(dá)軸索糖蛋白1抗體Anti-HIF1A Antibody維甲受體β(RARβ)
腐皮鐮孢非受體酪蛋白激2抗體Anti-HIF3A Antibody維甲受體α(RARα)
米曲霉疏展變種腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白5Anti-HIF1A Antibody(PB0245)維甲X受體α(RXRα)
平臍蠕孢菌腫瘤壞死因子CAnti-HIF3A Antibody圍脂滴蛋白5(PLIN5)
鞘單胞菌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β4抗體Anti-Histidine decarboxylase/HDC Antibody圍脂滴蛋白4(PLIN4)
Massilia namucuonensis轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激結(jié)合蛋白1抗體Anti-HK1 Antibody圍脂滴蛋白3(PLIN3)
釀酒酵母硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2抗體Anti-HK2 Antibody圍脂滴蛋白1(PLIN1)
香菇MAPK調(diào)控蛋白TRB2抗體Anti-HINT1 Antibody微小染色體維持缺陷蛋白5(MCM5)
*獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子2抗體Anti-HLA-A Antibody(PB0407)微小染色體維持缺陷蛋白2(MCM2)
突觸相關(guān)蛋白97抗體巴氏芽孢梭菌人卵巢上皮細(xì)胞
神經(jīng)細(xì)胞囊泡循環(huán)蛋白2抗體海水產(chǎn)堿菌人子宮成纖維細(xì)胞
突觸相關(guān)蛋白29抗體解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種人卵巢成纖維細(xì)胞
突觸泡蛋白2B抗體變色栓菌(云芝)人臍帶單核細(xì)胞
JAK2抑制劑(LY2784544)沙氏乳桿 (S)-(-)-3-氨基吡咯烷胃蛋白cElisa
茹氏短芽孢桿 鈉/Na總膽汁酸Elisa
柔毛鏈霉 磺苯甲酰乙型腦炎病抗體Elisa
燼灰鏈霉 鉬/MoN-羥乙酰神經(jīng)氨酸Elisa
糙孢籃狀 錳/MnI型膠原Elisa
居真細(xì) 2-氟-5-甲氧基苯II型膠原Elisa
肺炎克雷伯氏鼻硬結(jié)亞種 鎂/Mg緊密連接蛋白Elisa
類(lèi)馬鏈球 羧乙基鍺倍半氧化物(GE 132)緊密連接蛋白1Elisa
釀酒酵母 鋰/Li內(nèi)脂Elisa
大腸埃希 /K線粒體呼吸鏈復(fù)合物IElisa
Nocardiopsis 乙?;F流行性乙型腦炎病抗體Elisa
枯草芽孢桿 銥/Irα半乳糖抗原Elisa
黃色鏈霉 銦/In腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體Elisa
強(qiáng)酒海桿狀 二茂鐵甲酸蔗糖Elisa
枯草芽胞桿 鉿/Hf麥芽糖Elisa