商品介紹:
Trifluorothymidine是胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase)抑制劑,還能抑制胸苷酸合成酶(thymidylate synthase)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):70-00-8 別名:Trifluridine;FTD;5-Trifluorothymidine;NSC 529182;NSC 75520 純度:99.69% 分子量:296.2 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:胸苷磷酸化酶抑制劑(TFT)
英文名稱:Trifluorothymidine
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
地衣芽孢桿菌磷化微管相關(guān)蛋白抗體Anti-HDAC5 Antibody穩(wěn)定2(STAB2)
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌G蛋白偶聯(lián)受體TAS1R3抗體Anti-HDAC5 Antibody穩(wěn)定1(STAB1)
麥根腐平臍蠕孢端粒反轉(zhuǎn)錄抗體Anti-HDAC6 Antibody吻受體(KISS1R)
釀酒酵母DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體Anti-HDAC6 Antibody吻1(KISS1)
側(cè)耳T7 tag標(biāo)簽抗體Anti-HDAC7 Antibody紋蛋白3(STRN3)
釀酒酵母腫瘤壞死因子-α單克抗體Anti-HDAC8 Antibody紋蛋白(STRN)
Leucobacter aerolatus 腫瘤壞死因子-α/TNFα抗體Anti-HECTD3 Antibody胃脂(LIPF)
氈毛青霉激孤兒受體相關(guān)蛋白抗體Anti-HDAC9 Antibody胃泌調(diào)節(jié)(OXM)
云芝栓孔菌(變色栓菌)金屬蛋白組織抑制因子-3抗體Anti-Hepatitis B Virus Antibody胃泌抑制肽(GIP)
釀酒酵母Toll樣受體2抗體Anti-HDGF Antibody胃泌釋放肽(GRP)
溶桿菌Toll樣受體4抗體Anti-HEXA Antibody胃泌(GT)
釀酒酵母血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體Anti-HEXA Antibody胃動(dòng)受體(MLNR)
蚜蟲莫氏黑粉菌轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子SP1抗體Anti-HERC5 Antibody胃動(dòng)蛋白1(GKN1)
馬德里青霉內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液蛋白抗體Anti-HEXB Antibody胃蛋白原C(PGC)
北里胞菌色相關(guān)蛋白3抗體Anti-HFE Antibody胃蛋白原A(PGA)
海南根瘤菌轉(zhuǎn)錄因子DP3抗體(肝癌相關(guān)抗原661)Anti-HGD Antibody尾型同源框轉(zhuǎn)錄因子2(CDX2)
調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激SEI2抗體酒酒球菌人胚胎絨毛膜細(xì)胞
S100B蛋白抗體植物乳桿菌植物亞種人子宮頸上皮細(xì)胞
細(xì)胞分化蛋白SEPT6抗體醋化醋桿菌奧爾蘭亞種人子宮平滑肌細(xì)胞
突觸相關(guān)蛋白23抗體巴氏醋桿菌羅旺亞種人睪丸支持細(xì)胞
胸苷磷酸化酶抑制劑(TFT)葡萄座腔 釕/Ru過(guò)氧化Elisa
委內(nèi)瑞拉鏈霉 銠/Rh錳超氧化物歧化Elisa
土曲霉原變種 1,5-二氨基蒽醌垂草扁桃酸Elisa
枯草芽孢桿 錸/Re塞尼卡病抗體Elisa
土生空?qǐng)F(tuán)* 鉑/Pt雌受體αElisa
大豆慢生根瘤 苝-3,4,9,10-四羧酸二酐雌受體βElisa
金黃色葡萄球 鈀/PdD-乳糖Elisa
大腸桿 六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷副結(jié)核病Elisa
變化考克氏 鉛/Pb新城疫Elisa
釀酒酵母 總磷/P病Elisa
茄勞爾氏 磷/P趨化Elisa
pTRV 2 蒽醌-1-磺酸鈉鈣調(diào)蛋白激ⅡElisa
魚蛉假絲酵母 鎳/Ni蛋白激CElisa
湖北擬酵母 2,6-二叔丁基酚蛋白激CElisa
巨大芽胞桿 鈮/Nb胃蛋白aElisa