公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:蘇木素染液
英文名稱:Haematorylin Staining Solution
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
蘇木素是一種天然染料,是組胚,病理,泌尿,婦產(chǎn)科及各實(shí)驗(yàn)室中常用的染色劑,主要用于細(xì)胞核染色。帶正電荷的堿性染料蘇木素與細(xì)胞核中帶負(fù)電荷的酸性物質(zhì)結(jié)合使細(xì)胞核染成藍(lán)色。 操作步驟 1. 將樣本涂于清潔的玻片上,制成薄涂片 2. 將涂片放于95%乙醇固定5-6 分鐘,然后置空氣中晾干。 3. 滴加蘇木素染液6-8 滴蓋滿樣本,染色5-8 分鐘,流水洗去多余染液。即可鏡下觀察。此片一般可保存半年以上。若想多年長期保存可進(jìn)行4 和5 步操作。 4. 依次置入兩個(gè)無水乙醇缸中脫水,每缸1 分鐘。 5. 再移入二甲苯缸中,透明1 分鐘,中性樹脂封片,鏡檢。 染色結(jié)果:鏡檢結(jié)果:胞核呈藍(lán)紫色。 注意:染色太淺可重復(fù)步驟3,復(fù)染。染色太深可用0.1%鹽酸-酒精脫色。 儲(chǔ)存:室溫,有效期一年。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
(E)-N-Caffeoylputrescine英文名稱: 6-Benzylamino purine內(nèi)皮特異性分子1抗體包裝5g
(R,S)-告依春英文名稱: Water真核翻譯起始因子3F抗體包裝25g
(R型)人參皂苷Rg2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Maleic acid真核翻譯起始因子3H抗體包裝5g
(R型)人參皂3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium sulfate真核翻譯起始因子4G抗體包裝1g
(R型)人參皂苷Rh1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cesium chlorideβ4整合結(jié)合蛋白抗體包裝1g
(R型)人參皂苷Rh2英文名稱: Sodium phosphate, dibasic, heptahydrate食道癌相關(guān)基因4蛋白抗體包裝5g
(S型)人參標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: dATP 100 mM solution紅生成抗體包裝1g
(S型)人參皂苷Rh2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium decanoate胞漿環(huán)氧化物解抗體包裝25g
(S型)原人參三英文名稱: Agarose雌激受體相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
(±)-柚皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Agarose雌激相關(guān)受體β抗體包裝100g
1,2,3,4,6-O-沒食子酰葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phytohemagglutinin上皮膜蛋白2抗體包裝25g
1,2-O-Dilinoleoyl-3-O-β-D-g...英文名稱: Kinetin,6-Furfurylaminopurine基固羥化單加氧1抗體包裝500g
1,3-二咖啡酰奎寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: EGTA, egtazic acid端粒結(jié)合蛋白EST1A抗體包裝100g
1,7-雙-5-羥基-6-庚烯-3-英文名稱: Sodium phosphate, monobasic, anhydrous組蛋白賴N-基EZH1抗體包裝25g
1,8-桉葉英文名稱: Sodium lauroyl sarcosine上皮間質(zhì)相互作用蛋白1抗體包裝5g
高氏鏈霉菌Streptomyces│goshikiensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品碳酐12試劑盒芍藥內(nèi)酯苷;Albiflorin
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR碳酐試劑盒芍藥苷;Paeoniflorin
海底嗜冷桿菌Psychrobacter│submarinus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品肽酰脯酰異構(gòu)試劑盒升麻-3-O-L-阿拉伯糖苷;Cim
蘇木素染液擬粉紅鎖擲孢酵母 2-羥基-5-氯吡T抑制因子Elisa
斯氏梭 2-氯-5-三氟甲苯超氧陰離子Elisa
阿舒假囊酵母 氯鉑酸水合物嵌合蛋白2Elisa
釀酒酵母 2,3,6,7-四氯喹喔啉胸腺基質(zhì)生成Elisa
豬鏈球 4-基-3-甲酸甲酯核糖核酸A4Elisa
枯草芽胞桿 2-氨基-3-溴-5-氟卵黃蛋白原Elisa
節(jié)狀鐮孢 2-(N-Boc-3-基)乙肌動(dòng)蛋白Elisa
直絲淡紫灰鏈霉 3-氨基環(huán)己甲酸(順反異構(gòu)體混合物)SARSIgM抗體Elisa
慢生根瘤 3-氨基-N-甲酰凋亡調(diào)節(jié)因子Elisa
樟疫霉 2-溴-3-氟苯甲吡咯啉-5-羧酸合成Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 D型 α,ω-二甲基烯酸酯基聚乙二(MA-PEG-MA)3-磷酸肌依賴性蛋白激1Elisa
產(chǎn)氣弧 α,ω-二甲基烯酸酯基聚乙二(MA-PEG-MA)90kDa熱休克蛋白β1Elisa
醋化醋桿 α,ω-二甲基烯酸酯基聚乙二(MA-PEG-MA)甘油-3-磷酸脫氫Elisa
釀酒酵母 α,ω-二甲基烯酸酯基聚乙二(MA-PEG-MA)肝片吸蟲抗體Elisa
魯氏接合酵母 1,4-二甲基喹啉酮包蟲病抗體Elisa