G9a/GLP抑制劑(A-366)公司*的產(chǎn)品：Human matrilysin,MAT ELISA Kit 人質(zhì)裂解蛋白/質(zhì)溶木糖 99%
Human triple-helical peptide,THP ELISA Kit 人螺旋肽D-木糖 98%
Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Ki

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：G9a/GLP抑制劑(A-366)

英文名稱：A-366

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

枯草芽孢桿菌絲/蘇蛋白激TNN13K抗體Anti-HAVCR1 Antibody無脈絡(luò)膜蛋白(CHM)

根瘤菌環(huán)指蛋白16抗體Anti-HAVCR1 Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員9B(WNT9B)

游動(dòng)球菌胸腺五肽抗體Anti-HAVCR1 Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員7B(WNT7B)

大腸埃希菌白介1受體銜接蛋白抗體Anti-HBA1; Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員7A(WNT7A)

芽孢桿菌屬磷化白介1受體銜接蛋白抗體Anti-HAVCR2 Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5B(WNT5B)

平田頭菇腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3相互作用蛋白2抗體Anti-HCN1 Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5A(WNT5A)

微綠蠟質(zhì)菌癌抗雌激抵抗蛋白2抗體Anti-HBD Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員4(WNT4)

枯草芽孢桿菌枯草亞種凝血調(diào)節(jié)蛋白/血栓調(diào)節(jié)抗體Anti-HCN2 Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3A(WNT3A)

釀酒酵母腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體Anti-HCVAg Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3(WNT3)

PL12（平菇）腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體Anti-HDAC10 Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員2(WNT2)

水生黃桿菌神經(jīng)干抑制相關(guān)蛋白TRIM32抗體Anti-HDAC11 Antibody(PB0674)無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員11(WNT11)

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌抗體Anti-HDAC3 Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員10B(WNT10B)

抗生鏈霉菌速激肽受體3抗體Anti-HDAC2 Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員10A(WNT10A)

紅細(xì)菌屬凋亡相關(guān)蛋白5抗體Anti-HDAC3 Antibody無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員1(WNT1)

腐皮鐮刀菌微管蛋白γ/Tubulin γ抗體Anti-HDAC4 Antibody無孢蛋白(ASPN)

嗜乳桿菌血管生成受體1抗體Anti-HDAC5 Antibody蝸管蛋白(COIL)

肌漿網(wǎng)鈣ATP1/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP1抗體解脂亞羅酵母人輸尿管上皮細(xì)胞

SPNS1抗體溜曲霉人腎管狀上皮細(xì)胞

電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體分枝犁頭霉人胎盤羊膜細(xì)胞

結(jié)合珠蛋白家族3A1抗體紅曲霉屬人胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞
G9a/GLP抑制劑(A-366)釀酒酵母 5--8-羥基-7-喹啉磷酸化酪氨酸激Elisa

山夫頓堡沙門氏 鈦/Ti酮酸氧化Elisa

匍匐曲霉原變種 碲/Te胰島受體αElisa

大杯香菇 鉭/Ta囊尾蚴抗體Elisa

解脂假絲酵母 鍶/Sr高致病性藍(lán)耳病抗體Elisa

解淀粉芽孢桿 錫/Sn超氧化物歧化Elisa

Rathayibacter caricis 硅酸根/SiO32-脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2Elisa

棒黃曲霉 二氧化硅/SiO2過氧化6Elisa

靈芝 硅/SiN-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷Elisa

雞腿菇cc968 硒/Se總蛋白Elisa

越桔假絲酵母 鈧/ScS100鈣結(jié)合蛋白A9Elisa

黑曲霉 銻/Sb可溶性EndoglinElisa

釀酒酵母 1-(4-基苯基)-3-甲基-5-吡唑酮(4CMP)可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1Elisa

匍匐曲霉原變種 銻/SbElisa

靈芝屬 5--8-羥基喹啉還原Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)