商品介紹:
AT13387是Hsp90抑制劑,對A375細胞的IC50為18nM,具有長效的抗腫瘤活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:912999-49-6 別名:Onalespib 純度:99.64% 分子量:409.52 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Hsp90抑制劑(AT13387) | AT13387 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
釀酒酵母甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體Anti-GSTT1 Antibody性T-淋巴關(guān)聯(lián)抗原4(CTLA4)
紅須腹菌微管蛋白α/Tubulin α抗體Anti-GUSB Antibody程序性死亡蛋白6相互作用蛋白(PDCD6IP)
釀酒酵母狀腺T3抗體Anti-GSTP1 Antibody程序性死亡蛋白6(PDCD6)
糙皮側(cè)耳腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體Anti-GSTP1 Antibody程序性死亡蛋白5(PDCD5)
棘孢木霉促甲狀腺受體抗體(N端)Anti-GSTP1 Antibody(PB0144)程序性死亡蛋白1配體2(PDCD1LG2)
兔出血癥病甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體Anti-GYPA Antibody程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)
蟬花轉(zhuǎn)鈷蛋白2抗體Anti-GZMA Antibody程序性死亡蛋白1(PDCD1)
釀酒酵母跨膜蛋白74抗體Anti-GUSB Antibody錫蛋白(SNN)
普羅威登斯菌轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2抗體Anti-GZMB Antibody烯化磷1(ENOPH1)
木糖葡糖醋桿菌腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體Anti-GZMB Antibody烯化4(ENO4)
產(chǎn)氣列契瓦尼爾氏菌Toll樣受體8抗體Anti-H1-0 Antibody硒磷合成2(SEPHS2)
科貝特氏菌屬胸腺抗體Anti-H3C1 Antibody硒磷合成1(SEPHS1)
大腸埃希菌α微管蛋白乙酰轉(zhuǎn)移1抗體Anti-HAS2 Antibody硒蛋白P1(SEPP1)
舌螺狀菌TANC1蛋白抗體Anti-H2AFX Antibody硒代半胱裂解(SCLY)
蠟狀芽孢桿菌遺傳性耳聾β-tectorin抗體Anti-HAS1 Antibody戊糖(PTD)
勞地毛霉谷酰轉(zhuǎn)2抗體Anti-HAVCR1 Antibody無羊膜蛋白(AMN)
淋巴管內(nèi)皮細胞和血管內(nèi)皮細胞受體1抗體杰丁畢赤酵母人膀胱平滑肌細胞
跨膜蛋白SEMA4A抗體粘性絲孢酵母人前列腺上皮細胞
內(nèi)臟脂肪組織源性絲蛋白抑制蛋白抗體淺紅酵母人腎成纖維細胞
沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白4抗體異常畢赤酵母人尿道上皮細胞
Hsp90抑制劑(AT13387)硫磺 硫酸根(硫酸鹽)/SO42-還原型輔Ⅰ;煙酰腺嘌呤二核苷酸Elisa
釀酒酵母 硝酸根(硝酸鹽)/NO3-氧化型輔ⅠElisa
芬芳鐮刀 四[N-鄰苯二甲酰-(S)-苯氨酸]二銠乙酸乙酯加合物酮酸氧化Elisa
蠟狀芽孢桿 氟離子(氟化物)/F-鼠相關(guān)蛋白Elisa
假單胞屬 5-硝基-2-甲神經(jīng)肽YElisa
大腸桿 離子(化物)/Cl-促黑皮質(zhì)原Elisa
尖孢鐮孢 鋯/Zr瘟病E0蛋白抗體Elisa
植物乳桿 蒽醌-2-磺酸鈉鹽一氧化氮合運輸因子Elisa
土曲霉 鋅/Zn二肽Elisa
粘質(zhì)沙雷氏 鎢/W淀粉Elisa
蠟狀芽孢桿 帕莫酸羧肽AElisa
釀酒酵母 2,2-雙[4-(4-氨基苯氧基)苯基]烷白三烯B4Elisa
美澳型核果褐腐病 釩/V分泌型磷脂A2Elisa
Fibrella 4,4'-雙(4-氨苯氧基)聯(lián)大腸桿K99抗體Elisa
鯉鏈霉 /Tl心肌肌鈣蛋白TElisa