產(chǎn)品屬性:
中文名稱:B-RafV600E抑制劑(PLX-4720)
英文名稱:PLX-4720
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
PLX-4720是一種有效的,選擇性的B-RafV600E抑制劑,IC50值為13nM;與對c-Raf-1的選擇性相同,是對野生型B-Raf選擇性的10倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:918505-84-7 純度:99.62% 分子量:413.83 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
拜氏梭菌Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體Human PLRG1 ELISA Kit心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)
雷斯青霉血藍蛋白抗體Human PLSCR3 ELISA Kit心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)
赤霉菌腦海綿狀血管畸形蛋白1抗體Human PM20D2 ELISA Kit協(xié)同激分子受體(CMR)
白靈菇KBP蛋白抗體Human PLXNB1 ELISA Kit小表皮粘蛋白(SBEM)
地霉半乳糖酵母kappa型阿片受體抗體Human PLK2 ELISA Kit小而密低密度脂蛋白(sLDL)
慢生根瘤菌激肽原1重鏈抗體Human PMEPA1 ELISA Kit小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)
赤曲霉鈣激活通道蛋白β1抗體Human PLK3 ELISA Kit小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)
發(fā)酵畢赤酵母電壓門控性通道蛋白Kv4.2抗體Human LDLR(Low-density lipoprotein receptor) ELISA Kit小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)
白地霉磷化電壓門控性通道蛋白Kv4.2抗體Human PLK4 ELISA Kit相撲結(jié)合UBC9(UBE2I/UBC9/UBCE9)
柱孢犁頭霉磷化電壓門控性通道蛋白Kv4.2抗體Human PLK5 ELISA Kit腺相關(guān)病(AAV)
土生類諾卡氏菌KT3 tag抗體Human PLOD2 ELISA Kit腺苷脫(ADA)
香豌豆束莖病菌激肽釋放1抗體Human PLUNC ELISA Kit腺苷環(huán)化1(AC-1)
綠粘帚霉激肽釋放3/舒血管3抗體Human PLSCR4 ELISA Kit腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2(ABCG2)
枯草芽胞桿菌激肽釋放4抗體Human PLP2(Proteolipid protein 2) ELISA Kit腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1(ABCA1)
檸檬色短小桿菌組蛋白H3賴9甲基化1C抗體Human PLXDC2 ELISA Kit腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白G2(ABCG2)
鐮刀菌驅(qū)動蛋白家族Member14蛋白抗體Human PLEKHO2 ELISA Kit線粒體肽蛋亞砜還原(MSRA)
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)類葉升麻苷;麥角甾苷(毛蕊花糖苷)
焦耳Cottricia│pennes 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)升麻
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:含氮量:23.50-24.30 %升麻苷
B-RafV600E抑制劑(PLX-4720)金黃弗拉特氏 (1S,2S)-(-)-1,2-環(huán)己二D-鹽CD63分子Elisa
圍小叢殼 1-苯基-1-炔多殺性巴氏桿抗原B2Elisa
雕刻擬盤多毛孢 N-芐基奎寧[手性相轉(zhuǎn)移催化劑]T2Elisa
奇異球?qū)?/span> 3-氨基-2-己內(nèi)酰玉米赤霉烯酮Elisa
海水甲基桿 2-苯基咪唑Elisa
高盧蜜環(huán) N-甲基-2-(2-)吡咯烷赭曲霉Elisa
千葉鏈霉 2--6-氟苯甲肽聚糖Elisa
釀酒酵母 1,8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯肽聚糖識別蛋白Elisa
郝氏鏈霉 氘代酮堿性成纖維生長因子2Elisa
香菇8 2-甲基丁酸異酯腹瀉病Elisa
松杉靈芝 鹽酸金剛烷牛小腸堿性磷酸Elisa
苜蓿中華根瘤 2-甲基-3-硝基三氟甲苯腎上腺Elisa
芹側(cè)耳 N'-異亞基-2-磺?;|(zhì)金屬蛋白2Elisa
假堅強芽孢桿 四乙基氟化銨水合物基質(zhì)金屬蛋白9Elisa
鏈霉 1,3-二甲基-6-氨基脲嘧啶維生HElisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)